葫芦巴中薯蓣皂苷的提取与纯化研究

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应用超高压提取技术提取葫芦巴中薯蓣皂苷,在采用泡沫分离法粗纯化薯蓣皂苷的基础上,用制备型高效液相色谱法进一步纯化薯蓣皂苷,将FT-IR、HRMS等分析测试手段应用于结构的表征。具体研究工作内容如下:(1)采用超高压法提取葫芦巴中薯蓣皂苷,研究四个单因素对薯蓣皂苷提取得率的影响,在此基础上,利用响应面法优化整个工艺过程。由实验数据可得,最佳保压时间、保压压力、料液比、乙醇体积分数分别为563 s、360 MPa、1:30、71%,在此工艺参数下,薯蓣皂苷提取得率为5.02%。通过与两种传统提取方法作对比说明超高压提取技术是一种简单、有效提取葫芦巴中薯蓣皂苷的方法。(2)在超高压法提取葫芦巴中薯蓣皂苷的基础上,建立采用泡沫分离法纯化葫芦巴中薯蓣皂苷的新方法。将回收率及富集比作为评价指标,考察气速、上样浓度、温度和装液量对薯蓣皂苷的纯化效果,同时研究其体外抗氧化活性。研究结果表明,泡沫分离最佳条件为上样浓度0.03 mg/mL,温度28℃,气速450mL/min,装液量400 mL,在此工艺参数下,其回收率及富集比可达86.57%、3.82,且薯蓣皂苷具有较强的抗氧化活性。(3)采用制备型高效液相色谱进一步纯化泡沫分离后得到的泡沫层的溶液,最佳分离条件为:采用Hedera ODS-2柱(20×250 mm,10μm),流动相:水(A)和乙腈(B);进行梯度洗脱:0-5 min,5%B-15%B;5-15 min,15%B-45%B;15-35 min,45%B-100%B;流速为10 mL/min;进样量为5 mL;样品的出峰时间为15.57 min。(4)对采用制备型高效液相色谱纯化得到的样品进行FT-IR、HRMS、1H-NMR、13C-NMR表征,证明得到的样品为薯蓣皂苷。
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