银屑病是一种多基因促发的免疫异常性疾病，涉及到遗传、感染、代谢异常、创伤及精神紧张等诸多因素对机体免疫系统的影响。其病理特点主要是表皮角质形成细胞(KC)的过度增殖、分化异常及真皮内炎症细胞浸润明显。近年来促表皮增殖的细胞因子研究的较多，如表皮生长因子(EGF)、角质形成细胞生长因子(KGF)、转化生长因子一α(TGF-α)等，但以此为靶目标治疗并为取得非常理想的结果。越来越多的事实证明银屑病可能是细胞因子网络紊乱造成的，那么该病是否存在表皮KC的抑制功能下调呢？ 转化生长因子-βs(TGF-βs)是一类多功能的细胞生长因子，能够调节多类细胞的增殖、分化、迁移，促进细胞间质的形成和调控免疫反应，有研究显示TGF-β是KC的负调控生长因子。在人类，TGF-β有三种异构体，即TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3，它们与特异性受体结合才能发挥生物学效应。受体包括TGF-βR Ⅰ、TGF-βRⅡ、TGF-βRⅢ。TGF-βRI和TGF-βRⅡ都具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性，结构相同，但氨基酸数目不同，它们是TGF-β发挥生物学效应所必需与之结合的受体。自身磷酸化的TGF-βRⅡ首先直接结合配体，TGF-βRⅠ不结合游离的TGF-β，而是与结合在TGF-βRⅡ上的配体相互作用，形成多聚复合物，进而传递信号。TGF-βRⅢ又称β聚糖(betaglycan),不具有激酶活性，不直接参与信号转导，其功能是增加TGF-β与Ⅱ型受体结合，但不能增加与Ⅰ型受体的结合。Endoglin(CD105)是 TGF-β的一种结合蛋白，能够与TGF-β1和TGF-β3结合，但不能与TGF-β2结合，能阻止TGF-β与受体结合，将TGF-β保留在细胞外基质中，或灭活TGF-β，使TGF-β只能发挥短暂和局部的功能。总之，TGF-β与其相应的受体及结合蛋白协同发挥生物效应，主要是一种负的免疫调节作用，但也具有某些正的调节作用。 国外近年研究表明银屑病患者真皮微血管内皮细胞上TGF-β及受体的功能降低，TGF-β不能有效的发挥其负调控作用，使银屑病皮损淋巴细胞浸润明显。国内这方面的研究尚未见报道。另外，近年来有关TGF-β及受体的信号转导机制及其与 — —一 第二军医大学博士学位论文 高春芳 恶性肿瘤发病的关系有较多的研究，认为肿瘤的发生是由于肿瘤细胞逃脱了TGF 6的抑制能力，而表现为过度生长，设法提高TGF fi在肿瘤组织的表达或利用基因 转移技术将外源基因导入肿瘤将有助于肿瘤的治疗。关于TGF fi及受体与银屑病发 病的关系及作用机制尚不完全清楚。银屑病患者受累处表皮增殖，且在组织学上可 见明显的炎症改变，这是否由于银屑病受累处表皮TGF 6及其受体的表达下降而引 起的？是否由于银屑病患者受累皮损处真皮内微血管内皮细胞TGF 6的结合蛋白 endoglin表达上调而抑制了TGF fi的生物学活性，造成了受累皮损处炎性细胞聚 集？TGFfi及其受体在银屑病患者外周血中的单个核细胞上的 mRNA表达有无改 变？外周血中可溶性TGF P的含量改变与病情及预后有无关系？ 虽然国外有学者做了关于TGF P及受体与银屑病关系的部分研究工作，但不 够全面，且未见有关PMBC的TGF－a mRNA水平与银屑病致病的关系。本课题从 不同方面、不同水平全面深入的研究TGF 6及受体与银屑病关系。对两者之间发病 的关系进行深入研究将有助于对该病的全面理解，从一个新的角度来揭示银屑病的 发病机理，为该病的治疗提供更有效、更明确的靶目标。 第一部分 转化生长因子ps及受体在银屑病皮损中的蛋白表达 （一）目的：研究转化生长因子－ps（TGF－BI、TGF－B 2、TGF－P 3）、TGF－D受 体1、受体＊和结合蛋白endoglin在银屑病患者皮损和非皮损及正常皮肤 的原位表达情况，探讨TGF P超家族对银屑病表皮角质形成细胞增殖的 影响。 （二）方法：采用免疫组化 Enwsinn－－－x二步法对银屑病及正常人表皮 TGF fi及 受体原位表达进行比较研究。 （三）结果：通过免疫组化的方法证实了TGF－a S（TGF－pl、TGF．0 2、TGF－ fi 3）、TGF fi RI及 TGF P R 11在银屑病患者表皮处蛋白水平上表达缺失； 非皮损与正常皮肤的表皮组织均有阳性表达，主要在表皮的基底细胞层和 棘细胞层下方。TG下．e 2和TG卜e 3的阳性反应性比TG卜al强；TGF fi R 11的阳性反应性比 TGF 5 RI强；而结合蛋白 endoglin在皮损处的表 达?