多花水仙种质资源遗传多样性研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hq10000002
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多花水仙(Narcissus tazetta L.)为石蒜科水仙属多年生草本植物,其花枝数量和小花数量多,香气浓,在冬季开花。由于我国对水仙花研究起步较晚,品种少,花色单一,新品种选育周期长,严重制约水仙花产业的发展。本文通过搜集整理福建地区现有的多花水仙资源,从多花水仙资源植物学性状与生物学特性、细胞学水平和分子生物学水平进行遗传多样性分析。旨在研究各个多花水仙资源间的亲缘关系,为水仙的育种和栽培提供理论依据及数据支持。取得的主要研究结果如下:1.从搜集的多花水仙资源材料中选择15种,于2017年秋季在漳州进行露地栽培,观测其植物学性状及生物学特性。结果表明:15个水仙资源间的叶长、叶宽、花葶长度、每花葶小花数、小花直径、副冠直径、副冠杯深以及花药长度等有明显差异。萌芽期为10月底至12月底,抽葶期为11月底至翌年1月底,花期从12月初持续到第二年2月底,15个多花水仙的盛花期共延续81d,开花持续天数27~35d。根据花色可分为四大类型:第一类为两色花类型,含‘Chinese Sacred Lily’、‘Erlicheer’、‘Galilee’、‘Sol’、‘Winter Sun’、‘金三角’、‘云香’7个资源;第二类为白色花类型,含‘Znbal’、‘Ziva’、‘崇明(白)’3个资源;第三类为黄色花类型,含‘Golden rain’、‘Grand SD’or’、‘彩旺’3个资源;第四类为其他花色类型,仅‘绿状元’1种。按花期可以分为早、中、晚3种类型。本研究明确了15个资源的植物学性状和生物学特性,可为进一步利用资源选育水仙新品种提供参考。2.对8种多花水仙根尖采用常规压片制片,于显微镜下观察体细胞染色体数目并进行染色体核型分析。核型研究结果表明:8种多花水仙材料中有二倍体2种,三倍体6种,核型公式分别为‘Erlicheer’2n=3x=30=2(9sm+1st)+(8sm+2st);‘Galilee’2n=3x=30=2(5sm+5st)+(5sm+5st);‘Goldenrain’2n=2x=20=10sm+10st(SAT);‘Winter Sun’2n=3x=30=2(3sm+7st)+(3m+6st+1t);‘Ziva’2n=2x=22=8sm+14st;‘Avalanche’2n=3x=30=2(3sm+7st)+(6sm+4st);‘彩旺’2n=3x=30=12m+6sm+12st;‘小燕子’2n=3x=30=2(3m+5sm+2st)+(1m+7sm+1st+1t)。8种水仙染色体数目和核型分析结果不仅可以为其分类提供细胞学依据,同时也为利用这些品种资源选育新品种提供指导。3.SSR分子标记,作为水仙属植物遗传多样性和种质资源鉴定的重要分子标记。为了开发新的水仙SSR标记,本研究通过运用生物信息学软件MISA检测‘云香’水仙不同花期转录组序列中的SSR序列位点,并运用Primer 3.0软件对检索到的SSR序列进行引物设计。结果显示,本研究中共检测到14581个SSR位点,分布在12361条unigenes中,出现频率为19.95%,平均距离3.87kb/SSR;SSR长度为12-30bp不等;重复次数为4-24次不等。其中,单核苷酸重复类型占比最高(52.82%),二核苷酸重复类型(16.72%)和三核苷酸重复类型(26.92%)次之。除单核苷酸重复基元外,二核苷酸重复基元AG/CT出现频次最高,而AAG/CTT次之。通过筛选共计得到16355对SSR引物。从筛选的引物中随机挑选20对交由生物公司合成,然后进行RCP扩增,20对引物中有16对引物扩增出比较清晰的条带,扩增率高达80.00%。综上,‘云香’水仙不同花期转录组测序数据,可以当作SSR标记开发的有效来源之一,该转录组中的SSR位点出现频次较高、种类较多、多态性潜能较高,为水仙属植物的种质鉴定、分子育种和遗传多样性等方面奠定一定的基础。
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