昆白系小鼠体外受精

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cn1976
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体外受精在医学、生物学等相关领域已得到广泛的应用,但是体外受精及受精卵体外培养体系还有待于进一步完善。昆白小鼠是我国自行繁殖的近交系小鼠,由于其遗传背景清楚、生殖周期短、环境适应能力强等优点,是研究哺乳动物体外受精的良好的实验动物。为了建立更为简单、高效的体外受精及胚胎培养体系,提高体外受精率和体外发育的胚胎质量。本研究以昆白小鼠为研究对象,从胚胎培养液的筛选、肝素对精子活力的影响、不同获能液对受精率的影响、不同培养液对胚胎发育的影响、不同培养体系对胚胎发育的影响等,5个方面对昆白小鼠体外受精进行了研究。结果表明:1.添加10%NBS的KSOM和G1/G2培养液均能较好支持小鼠2-细胞胚胎发育到囊胚(89.52%和87.08%)。同时,添加10%FBS组的囊胚率也显著高于相应的添加BSA组(P<0.01)。2.筛选小鼠精子获能液中的肝素的最佳添加量。未添加肝素组受精率(41.75%)高于添加1μg/mL、3μg/mL及5μg/mL组(31.00%、18.80%、22.43%),差异显著。3.原装进口精子获能液HTF(MR-070)受精率(85.71%)显著高于自配的三种体外受精HTF、T6、Whittingham的体外受精率(38.58%、10.22%、24.64%)。受精卵培养24h观察,HTF、T6、Whittingham中碎裂率(23.62%、20.44%、32.61%),显著高于原装HTF(3.57%)。4. G1/G2中培养的体外受精胚胎囊胚率达到77.50%,明显高于原装KSOM和自配KSOM组(22.78%、0)。5.与非共培养体系相比,颗粒细胞共培养,能够促进昆白小鼠胚胎克服2-细胞阻滞,显著提高小鼠体外受精胚胎的4-细胞(37.97%、59.72%)、桑椹胚(27.85%、48.61%)及囊胚率(22.70%、45.83%)。
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