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目的:
考察口服黄柏干预对大鼠胃肠道菌群多样性的影响,以及对不同胃肠段优势菌群数量的影响,探讨黄柏对大鼠胃肠道菌群结构的影响。
方法:
制备黄柏水煎剂,按高、中、低剂量组对150只SPF级别雌雄各半的SD大鼠进行黄柏水煎剂灌胃,并设纯水灌胃的空白对照组以及林可霉素灌胃的抗生素对照组,每组各30只。在灌胃给药一周、二周、三周结束时,将各组动物随机抽取10只进行取材,采集大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠及内容物,提取不同部位样本中的细菌DNA,应用PCR技术对细菌16s rDNA V3区扩增后进行变形梯度凝胶电泳,利用Quantity one分析胃肠道内菌群多样性的变化情况;应用实时荧光定量PCR技术检测不同时间点大鼠胃肠道中大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、梭菌属及拟杆菌的起始拷贝数,并对其数量变化进行统计学分析。
结果:
1.黄柏对大鼠各胃肠段菌群多样性的影响。各组胃肠道菌群多样性变化如下:胃部低剂量组一周,中剂量组三周及高剂量组二周、三周较空白组显著升高(P<0.05);十二指肠低剂量组一周较空白组显著升高(P<0.05),低、中、高剂量组三周较空白组显著降低(P<0.05);空肠部位低、中、高剂量组三周较空白组显著升高(P<0.05);回肠部位低剂量组二、三周较空白组显著升高(P<0.05),中剂量组一、三周及高剂量组一周较空白组显著升高(P<0.05);结肠部位中剂量组一、二、三周较空白组显著升高(P<0.05)。
2.黄柏对大鼠各胃肠段优势菌群数量的影响。(1)在低剂量黄柏的影响下,十二指肠给药组三周内大肠杆菌数量都有明显的增多(P<0.01),在二周时拟杆菌数明显增多(P<0.01),在给药一、二、三周梭菌属数量都有明显增多(P<0.01);回肠在给药一周和三周时乳酸杆菌数量明显增多(P<0.01);结肠在给药三周时乳酸杆菌数量明显增多(P<0.01),在给药一、二、三周肠球菌数量都有明显减少(P<0.01)。(2)在中剂量组黄柏的影响下,空肠、回肠及结肠在给药三周时乳酸杆菌数量明显增多(P<0.01);胃部在给药一、二、三周大肠杆菌数量都有明显增多(P<0.01);十二指肠在给药一、二、三周梭菌属数量都有明显增多(P<0.01);空肠在给药一、三周肠球菌数量有明显减少(P<0.01);回肠在给药一周时肠球菌数量有明显减少(P<0.01);结肠在给药一、二、三周肠球菌数量都有明显减少(P<0.01)。(3)在高剂量黄柏的影响下,胃部在给药一周时大肠杆菌数量明显在增多(P<0.01);十二指肠在给药一、二、三周梭菌属数量都有明显增多(P<0.01);回肠在给药一周时肠球菌数量有明显减少(P<0.01);结肠部位给药一、二周时大肠杆菌数量明显增多(P<0.01)。
结论:
1.黄柏长期给药对大鼠十二指肠部位菌群多样性具有抑制作用,对胃、空肠、回肠及结肠部位的菌群多样性具有一定的促进作用。
2.黄柏能促进大鼠胃肠道内的乳酸杆菌、大肠杆菌及梭菌属的数量增加,对各部位的影响程度有所不同;会使大鼠胃肠道内的肠球菌的数量减少,对拟杆菌的影响呈现出增减双向效应。
考察口服黄柏干预对大鼠胃肠道菌群多样性的影响,以及对不同胃肠段优势菌群数量的影响,探讨黄柏对大鼠胃肠道菌群结构的影响。
方法:
制备黄柏水煎剂,按高、中、低剂量组对150只SPF级别雌雄各半的SD大鼠进行黄柏水煎剂灌胃,并设纯水灌胃的空白对照组以及林可霉素灌胃的抗生素对照组,每组各30只。在灌胃给药一周、二周、三周结束时,将各组动物随机抽取10只进行取材,采集大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠及内容物,提取不同部位样本中的细菌DNA,应用PCR技术对细菌16s rDNA V3区扩增后进行变形梯度凝胶电泳,利用Quantity one分析胃肠道内菌群多样性的变化情况;应用实时荧光定量PCR技术检测不同时间点大鼠胃肠道中大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、梭菌属及拟杆菌的起始拷贝数,并对其数量变化进行统计学分析。
结果:
1.黄柏对大鼠各胃肠段菌群多样性的影响。各组胃肠道菌群多样性变化如下:胃部低剂量组一周,中剂量组三周及高剂量组二周、三周较空白组显著升高(P<0.05);十二指肠低剂量组一周较空白组显著升高(P<0.05),低、中、高剂量组三周较空白组显著降低(P<0.05);空肠部位低、中、高剂量组三周较空白组显著升高(P<0.05);回肠部位低剂量组二、三周较空白组显著升高(P<0.05),中剂量组一、三周及高剂量组一周较空白组显著升高(P<0.05);结肠部位中剂量组一、二、三周较空白组显著升高(P<0.05)。
2.黄柏对大鼠各胃肠段优势菌群数量的影响。(1)在低剂量黄柏的影响下,十二指肠给药组三周内大肠杆菌数量都有明显的增多(P<0.01),在二周时拟杆菌数明显增多(P<0.01),在给药一、二、三周梭菌属数量都有明显增多(P<0.01);回肠在给药一周和三周时乳酸杆菌数量明显增多(P<0.01);结肠在给药三周时乳酸杆菌数量明显增多(P<0.01),在给药一、二、三周肠球菌数量都有明显减少(P<0.01)。(2)在中剂量组黄柏的影响下,空肠、回肠及结肠在给药三周时乳酸杆菌数量明显增多(P<0.01);胃部在给药一、二、三周大肠杆菌数量都有明显增多(P<0.01);十二指肠在给药一、二、三周梭菌属数量都有明显增多(P<0.01);空肠在给药一、三周肠球菌数量有明显减少(P<0.01);回肠在给药一周时肠球菌数量有明显减少(P<0.01);结肠在给药一、二、三周肠球菌数量都有明显减少(P<0.01)。(3)在高剂量黄柏的影响下,胃部在给药一周时大肠杆菌数量明显在增多(P<0.01);十二指肠在给药一、二、三周梭菌属数量都有明显增多(P<0.01);回肠在给药一周时肠球菌数量有明显减少(P<0.01);结肠部位给药一、二周时大肠杆菌数量明显增多(P<0.01)。
结论:
1.黄柏长期给药对大鼠十二指肠部位菌群多样性具有抑制作用,对胃、空肠、回肠及结肠部位的菌群多样性具有一定的促进作用。
2.黄柏能促进大鼠胃肠道内的乳酸杆菌、大肠杆菌及梭菌属的数量增加,对各部位的影响程度有所不同;会使大鼠胃肠道内的肠球菌的数量减少,对拟杆菌的影响呈现出增减双向效应。