六妹羊肚菌(Morchella sextelate)子囊孢子种的选育

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由于生物、非生物及自身的影响,导致羊肚菌的产量不稳定,其中最为重要的影响因素是羊肚菌菌种的品质。本文以通过驯化后于室外地中广泛栽培的六妹羊肚菌母种为材料,经过地栽获得该种的子实体。用组织分离法获得该种的组织分离种F1代,称为F1-Mti;同时利用其子实体采取孢子弹射法后获得子囊孢子单孢子种F1-Mas。将获得的子囊孢子单孢子种制成栽培种,再次下地栽培得到对应的子实体组织分离种F1-Mas-ti,优选产量高的单孢子种栽培后获得的组织分离种。并测试了原组织种F1-Mti、单子囊孢子种F1-Mas及对应组织分离种F1-Mas-ti在菌丝生长速度、菌核产生数量及抗病性方面的差异。主要结果如下:(1)第一年栽培实验后,获得了六妹羊肚菌子实体,通过组织分离得到组织分离种F1-Mti多支;通过对其中一株长势好而健壮的成熟子实体的子囊孢子采取单孢子分离策略,得到68份子囊孢子单孢菌种,分别命名为F1-Mas1~F1-Mas68。(2)第二年栽培实验,实验结果表明68株单孢菌株中有57株单孢菌株可出菇,可出菇率为84%。其中F1-Mas2、F1-Mas67两株菌株的产量最高,分别为392.002kg/亩、320.002 kg/亩,而其余的子囊孢子种的产量均低于184.001 kg/亩,与高产的两株菌株的产量之间具有较大的差异。原组织分离种F1-Mti产量为224.112 kg/亩。选取单孢子种中产量最高的两株菌株F1-Mas2、F1-Mas67中生长健壮的子实体,进行组织法菌种分离获得对应的组织分离种F1-Mas-ti2、F1-Mas-ti67。(3)第三年栽培实验时,获得的5株菌株F1-Mas2、F1-Mas67、F1-Mti、F1-Mas-ti2、F1-Mas-ti67分别制成栽培种后栽培,实验结果表明F1-Mti、F1-Mas2、F1-Mas67、F1-Mas-ti2、F1-Mas-ti67的出菇量分别为296.00 1kg/亩、520.003 kg/亩、408.002 kg/亩、112.001 kg/亩、168.001 kg/亩。(5)5株菌株在4种不同碳源(淀粉、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖)的培养基中菌丝生长差异实验结果表明,在4种不同的碳源中F1-Mti菌株与F1-Mas67菌株的生长速度较快,其中F1-Mti与F1-Mas67在可溶性淀粉为碳源的培养基中菌丝生长速度最快;而F1-Mas-ti2在所有碳源培养基中的生长速度均最慢。(6)5株菌株在5种不同氮源(蛋白胨、尿素、硫酸铵、硝酸铵、硝酸钾)的培养基中菌丝生长差异实验结果表明,在5种不同氮源培养基中F1-Mti菌株菌丝的生长速度均快于其它4株菌株,在蛋白胨为氮源的培养基中的菌丝生长速度最快;而F1-Mas-ti2在5种不同氮源培养基中的生长速度均较慢,其中在尿素为氮源的培养基中的菌丝生长速度最慢。(7)5株菌株菌核生长实验结果表明F1-Mti、F1-Mas2、F1-Mas67在培养基中既产生气生菌核也产生基面菌核;F1-Mas-ti2和F1-Mas-ti67则只产生气生菌核。其中F1-Mas2产生的菌核数量最多;而F1-Mas-ti2产生的菌核数量最少。(8)5株羊肚菌菌株抗病实验结果表明5株菌株对枝孢菌都具有较好的抗性。其中F1-Mas2对枝孢菌的抗性最好;F1-Mas-ti67的抗性最弱。在与被孢霉的抗性实验结果表明F1-Mas2对被孢菌具有较好的抗性;F1-Mas67对被孢霉的抗性则较弱。在与被孢霉的抗性实验结果表明F1-Mas2对根霉抗性最佳;而F1-Mti对根霉抗性最差。从5株菌株的生理生化、抗病力及产量分析,新选育的子囊孢子单孢种在产量及抗性上既优于其亲本菌株,也优于由它们栽培后获得的组织分离株,而比较这2株子囊孢子单孢种,则发现F1-Mas2的综合表现力优于F1-Mas67。
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