海洋中存在着种类繁多的微生物类群,是获取新药和新酶种的宝贵资源,具有很好的开发前景。极端环境微生物是微生物学领域中研究的热点,适冷菌是极端微生物中的一类,在海洋中广泛分布,是分离适冷酶的良好材料。适冷酶在低温下具有较高的催化效率,在需要低温催化的行业如洗涤、食品、奶制品、皮革加工、医药和化妆中具有较高的应用价值,因而引起各国科学家的广泛关注。 本文研究了两株适冷蛋白酶的高产菌株L09和SM-9913的酶学特性,以及盐度、无机离子(Ca²⁺,Mg²⁺,Fe²⁺,Mn²⁺)对酶活力的影响,同时,对二糖,多糖和无机离子对酶液稳定性的保护进行了初步研究。讨论了不同浓度的盐和无机离子对酶液的瞬时激活和抑制作用,探讨了适冷蛋白酶的应用前景,以及海藻糖作为酶的稳定剂的应用价值。研究结果表明,菌株L09和SM-9913所产的适冷蛋白酶的最适pH值,最适酶活温度分别为8.0和40℃;8.5和35℃。可见这两种蛋白酶都是碱性蛋白酶。50℃下保温半小时,L09和SM-9913所产蛋白酶的酶活丧失百分率分别为57%和74.9%。可见,L09所产蛋白酶的热稳定性要好于SM-9913的热稳定性。 L09和SM-9913两种低温菌所产的蛋白酶是胞外酶,所以海水环境中的盐度与无机离子对这两种蛋白酶的活力具有一定的影响。从盐度实验的结果来看,不同浓度的NaCl和无机离子对酶活力表现出不同的抑制或激活作用。 以海藻糖,海藻酸钠Ca²⁺作为二糖,、多糖和无机离子的代表,对酶进行稳定性保护的研究,从实验结果来看,20℃下海藻糖对酶的稳定性保护具有较明显的效果。