鸡传染性贫血(chicken infectious anemia, CIA)是由鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus, CIAV)引起的传染病,其主要危害是直接损害鸡的造血器官和淋巴组织,从而引起免疫抑制,使鸡对其它病原的易感性增加,导致患病鸡群的发病和死亡,造成严重的直接或间接经济损失。CIAV基因组编码三种蛋白,其中VP3蛋白(又称凋亡素)是目前已知的该病毒的唯一致病因子。因此,本研究根据CIAV基因组的特点,参照有关资料,合成了一对扩增整个VP3基因及部分VP1、VP2基因序列的引物,建立了用于CIA临床诊断的PCR方法,并应用该方法对安徽省该病的流行病学进行研究,为准确而详实地掌握该病对安徽省养鸡业的危害情况、分子流行病学及制定有效的疾病防制措施提供理论依据和技术支持。同时在此基础上建立了能同时诊断鸡传染性贫血(chicken infectious anemia, CIA)、马立克氏病(Marek’s disease, MD)、网状内皮增生症(Reticuloendotheliosis, RE)、禽白血病(Avian leucosis, AL)等四种病毒性免疫抑制病的多重PCR方法,并将所建立的方法直接用于临床上这四种免疫抑制病的诊断、流行病学及混合感染情况调查等的研究。通过对常规DNA抽提方法进行改进,使整个诊断过程由原先的需时8个小时以上缩短为在5个小时内完成,使该法具有快速、特异、敏感等优点,能很好地满足临床快速诊断的需要。应用本课题所建立的PCR诊断方法,对2003年9月～2005年3月期间来自安徽省65个鸡群的185个病例共986份组织样品进行了CIAV的检测,并对病例的主要临床特征进行调查记录。CIAV检测的结果表明,该病毒已在安徽省鸡群中普遍存在,平均阳性率为25.95%;对不同品种、不同日龄鸡的检测结果表明,各种品种、不同日龄鸡均可感染CIAV,其中以三黄鸡阳性率最高;30日龄以内鸡只的发病率较高;不同器官的检测表明,骨髓的检出率最高。应用本课题所建立的多重PCR方法,对所收集的病例同时进行CIAV、MDV、REV和ALV等四种免疫抑制性病毒的检测,同时参照相关文献进行了传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)的检测。结果鸡群中多种免疫抑制性病毒混合感染的现象已很普遍,CIAV与MDV、REV、ALV和IBDV二重或多重感染率达22.32%。调查结果证实,免疫抑制性疾病在安徽省的商业鸡群中普遍存在,并与鸡群疾病多而复杂、损失大相关。