【摘 要】
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小麦(Triticum aestivum L.)是世界上最重要的粮食作物之一。分蘖是影响小麦产量的一个重要农艺性状,它一直是育种过程中的一个主要筛选的性状,其突变体是研究小麦分蘖发育分子
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小麦(Triticum aestivum L.)是世界上最重要的粮食作物之一。分蘖是影响小麦产量的一个重要农艺性状,它一直是育种过程中的一个主要筛选的性状,其突变体是研究小麦分蘖发育分子机理的理想材料。对其突变体的深入研究有助于探索了解影响小麦分蘖发育机理,为进一步的小麦品种改良奠定基础。本实验通过对一个小麦矮化,不分蘖突变体dmc(dwarf-monoculm)的表型和转录组研究,获得了以下结果:1.与亲本“国麦301”相比,突变体dmc几乎不分蘖,植株矮小,株高48.00 cm、茎节减少、穗长6.48 cm、幼苗叶片黄绿,拔节后变正常绿色,主茎小穗数、穗粒数和千粒重均显著小于亲本国麦301,抽穗期、开花期和成熟期均较国麦301推迟7天以上。组织学观察突变体与“国麦301”的分蘖基部,发现dmc细胞大小变小了一些。2.用431对SSR引物检测亲本“国麦301”和突变体dmc间的遗传多样性,没有发现差异位点,表明两者遗传背景高度一致,证明dmc是源自“国麦301”的突变体。中国春平均分蘖34个,dmc平均分蘖1.1个,突变体dmc/中国春杂交F1代平均分蘖4.48个,提示独秆性状可能由显性或半显性基因控制。3.构建突变体dmc和“国麦301”分蘖原基的两组混池,每组三个重复(dmc:T1,T2和T3,国麦301:T4,T5和T6)共计6个混池,进行m RNA转录组水平分析:共得到了68.8 Gb数据和231,715,158个双端测序reads。以中国春基因组为参考基因组,超过80%的数据对比到参考基因组上。4.基因差异表达分析:在突变体dmc和“国麦301”中得到4,904个差异表达基因(DEGs),其中69%上调,31%下调。对差异表达基因以及他们涉及的功能进行GO和KEGG途径分析,GO功能分类显示对刺激的应答,信号(生物学过程),膜结构;苯丙基类生物合成途径是最富集的上调途径,剪接体是最富集的下调途径。筛选12个差异表达基因进行q RT-PCR分析。差异表达基因涉及很多生物学过程,例如复制、转录、翻译、糖物质转运与代谢、激素合成与代谢、信号传导。特别是生长素,细胞分裂素,转录因子KNOX1和WOX4的表达被抑制。
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