小鼠生后海马CA3区GABA能神经元动作电位发放容量动态变化

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目的:研究生后不同发育阶段海马CA3区GABA能神经元动作电位发放容量的变化,探讨在发育过程中该类神经元分析编码神经信号能力的成熟规律。  方法:采用膜片钳技术记录绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠脑片中GFP标记的GABA能神经元电活动。取生后6-12天(未睁眼)和15-17天(睁眼)的绿色荧光蛋白转基因小鼠行异氟烷麻醉,迅速将大脑分离并做矢状切片(400μm)。将有海马组织的脑片放置氧合的人工脑脊液(ASCF)在25?C下孵育1-2小时后转移至灌流槽,在31?C下对脑片进行灌流。采用IR-DIC光学显微镜(Nikon E600FN)选择海马CA3区 GABA能神经元;运用 Axoclamp-2B放大器全细胞记录法记录海马 CA3区GABA能神经元动作电位;信号输入pClamp9.2软件获取和分析群集发放的动作电位间距(inter-spike interval,ISI)和动作电位峰时程标准差(standard deviation of spike timing,SDST)和绝对不应期(absolute refractory periods, ARP),以分析此类抑制性神经元电生理特性及功能发育规律。  结果:与未睁眼小鼠相比较,睁眼后小鼠海马CA3区GABA能神经元群集动作电位的发放容量降低(P<0.05)。内在特性表现为绝对不应期无变化(P>0.05),阈电位差(Vts-Vr)降低(P<0.05),后超极化增加(P<0.01)。发育中动作电位发放能障增加(P<0.01),去极化时程延长(P<0.01)。  结论:  1.海马CA3区GABA能神经元动作电位发放容量随发育而降低  2.后超极化通过增加动作电位发放能障和延长去极化时程,从而降低动作电位发放容量。
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