SPS制备多孔HA材料复合兔BMSCs骨修复材料的生物学性能研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xffys3
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目的利用SPS烧结制备多孔HA,在体外与兔BMSCs复合,进行材料降解性、毒性、溶血性、细胞相容性检测及电镜观察。探讨SPS烧结制备的多孔HA生物性能,为临床上制备新的骨修复替代材料提供科学的实验依据与理论基础。方法采用红细胞裂解贴壁法扩增兔BMSCs,并进行细胞形态观察、细胞免役学鉴定、诱导分化能力鉴定。利用SPS技术烧结制备多孔HA,通过PBS侵泡研究多孔HA的体外降解性能,通过MTT法研究多孔HA的细胞毒性,通过扫描电镜观察多孔HA与细胞的相容性,通过体外溶血实验研究多孔HA的溶血性。通过体外诱导实验研究多孔HA对BMSCs分化能力的影响。结果1.倒置相差显微镜下可见到活性及传代能力很强的大量梭型贴壁细胞,流式细胞仪鉴定结果表明所培养的细胞高表达BMSCs表面标志CD44、CD90、CD105;低表达CD34、CD45等造血细胞表面标志,证实所培养的细胞为兔BMSCs;2.SPS烧结制备的多孔HA在PBS中的降解率随时间增加而增加,降解速率前期很快,后期降解速率变慢,在第10周以后,降解率趋于平稳;3.经MTT法OD值测定,SPS烧结制备的多孔HA复合BMSCs组与正常组间无统计学差异(配对t检验,P=0.1542),表明SPS烧结制备的多孔HA无毒性;4.扫描电镜下可见多孔HA表面有细胞粘附,材料孔隙内有大量细胞长入;表明SPS烧结制备的多孔HA具有良好的细胞相容性;5.SPS烧结制备的多孔HA溶血率未超过5%,表明其在体外实验中不引起溶血反应;6.体外成骨诱导实验可见圆形和卵园形钙化结节,茜素红染色阳性;体外成脂诱导实验可见圆形脂滴,油红O染色阳性,表明与SPS烧结制备的多孔HA复合的BMSCs具备成骨、成脂分化能力。结论SPS烧结制备的多孔HA具有良好的细胞相容性、无毒性、无溶血反应,可在体外降解,与BMSCs复合不影响其成骨成脂分化能力,BMSCs能在材料表面粘附、贴壁生长,能长入材料孔隙中粘附生长,是一种新制备的人工骨修复材料。
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