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目的:筛选得到与DEAF1相互作用的蛋白质因子,鉴定DEAF1与候选蛋白质因子之间的相互作用,探讨DEAF1调控外周组织抗原基因表达的分子机制。 方法:(1)通过质谱分析获得了可能与DEAF1相互作用的蛋白质因子,对这些候选的蛋白质因子进行功能分类;(2)从GenBank获取候选蛋白质因子的cDNA序列,PCR技术扩增相应的cDNA,测序,构建真核表达质粒,带上标签;(3)将真核表达质粒分别转染入293T-Deaf1细胞中,用Western bolt检测其表达;(4)用免疫共沉淀验证所筛选蛋白与DEAF1之间的相互作用。 结果:(1)对质谱结果进行功能分析,发现有18种蛋白质因子可能与DEAF1调控外周组织抗原基因表达调控有关;(2)克隆得到了3个候选蛋白质因子的cDNA序列,构建了真核表达质粒,质粒导入哺乳动物细胞能够表达;(3)免疫共沉淀的结果显示,已经克隆的候选蛋白质因子有2个可能与DEAF1存在相互作用,这部分结果需要进一步验证。 结论:用免疫共沉淀和质谱技术筛选得到了4组候选的与DEAF1相互作用的蛋白质因子;克隆得到了3个候选蛋白质因子的cDNA序列,构建了真核表达质粒;免疫共沉淀的初步结果发现2个候选蛋白质因子可能与DEAF1有相互作用。