【摘 要】
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TCDCA作为胆汁酸的主要成分,已被证实可介导多种信号通路,从而发挥其抗炎免疫调节的作用。本研究旨在深入探讨TCDCA能否与TGR5受体发生相互作用,继而参与由TGR5受体介导的信
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TCDCA作为胆汁酸的主要成分,已被证实可介导多种信号通路,从而发挥其抗炎免疫调节的作用。本研究旨在深入探讨TCDCA能否与TGR5受体发生相互作用,继而参与由TGR5受体介导的信号转导通路。本研究构建了TGR5真核表达载体,并在293T细胞中进行了表达,在此基础上,采用免疫荧光、实时荧光定量PCR技术、western blotting技术,鉴定了TGR5受体在293T细胞中的表达。采用荧光显微镜观测法,检测了293T细胞受体内陷;采用ELISA法,测定了293T细胞内cAMP含量,分析了TCDCA的量效关系,293T细胞中荧光素酶报告基因活性。结果显示,TGR5真核表达载体构建成功,并能够在239T中表达。TCDCA作用TGR5后,可引起转染TGR5受体的293T细胞内陷反应,细胞内cAMP和萤光素酶含量显著升高(P<0.01),且呈现剂量依赖性关系(r2=0.9958)。结论:TCDCA能够与TGR5发生相互结合。
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