调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路的分析

来源 :江苏省畜牧兽医学会成立60周年庆典暨2015年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyuanzhen001
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  [目的]本研究旨在探寻参与调控鸡雄性性原细胞分化的关键基因和信号通路,以期提高雄性生殖细胞的体外诱导生成效率。[方法]采用流式细胞分选法获得纯化的鸡胚胎干细胞(Embryonicstem cells,ESCs)、原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)和精原干细胞(Spermatogonial Stem cells,SSCs),利用Microarray、RNA-seq 技术系统地分析了三种细胞的转录本差异,筛选出参与调控鸡雄性性原细胞分化的候选关键基因和信号通路;采用qRT-PCR 对上述结果进行验证。
其他文献
[目的]本试验旨在研究饲粮中添加蛋氨酸与甜菜碱对21~70 日龄扬州鹅生长性能、体尺性状、屠宰性能和器官指数的影响。[方法]试验采用2×3 二因子试验设计,研究在蛋氨酸相对缺乏的扬州鹅饲粮中添加3 个水平蛋氨酸(0,600 和1 200 mg/kg)和2 个水平甜菜碱(0 和600 mg/kg)对仔鹅的影响。
本文旨在克隆苏禽黄鸡Nanog 基因启动子,并构建含有双荧光素酶报告基因的表达载体进行启动子活性分析,找出该基因启动子的核心调控区;探索甲基化抑制剂5-Azadc(5-aza-2-deoxycytidine)或曲古抑菌素(Trichostatin A,TSA)对Nanog 基因启动活性及其ESC 体外培养条件下多能性维持的影响,为初步阐明Nanog 基因的表达调控机制提供理论依据。
为了克隆鹅生长激素基因并表达其重组蛋白,本实验采集生长期鹅垂体组织,并利用TRIzol从中快速提取的总RNA 为模板,反转录为cDNA.根据鹅生长激素基因成熟肽序列(Genbank 号:AY149895.2)设计一对引物,分别在上下游引物的5端引入Nhe Ⅰ和Hind Ⅲ两酶切位点.
本研究旨在探索鹅对不同非常规饲料的利用率。试验以30只成年太湖鹅公鹅为研究对象,随机分为5组,每组6个重复,每个重复1只,随机选取一组为内源排泄物对照组。空腹24小时后,每组强饲一种饲料,组内每只鹅强饲量相同,内源排泄物对照组不强饲。
为解决规模化肉鸭生产中粪污影响鸭健康和污染环境的问题,研发了一种发酵床结合网床架养新技术及其配套的可移动式网床下发酵床垫料翻耙系统,并研究了该模式在控制舍内气载微生物数量和提高鸭生产性能中的优势。
为解决规模化肉鸭生产中粪污影响鸭健康和污染环境的问题,研发了一种发酵床结合网上养殖新技术,并利用研制的可移动网床下发酵床翻耙系统比较分析了发酵床平养和发酵床网养对舍内空气病原菌浓度和鸭生产性能的影响。
本研究探讨了鸡蛋在盛夏室内自然条件下,不同贮存时间对鸡蛋微生物变化情况的影响.结果表明,鸡蛋外壳和内容物菌落总数随着存放时间(0~25 d)延长呈上升趋势,变化范围分别在1.70×104~4.69×105 CFU/g 和 0~9.5×107 CFU/mL 之间.鸡蛋外壳大肠菌群总数随着时间的延长先不断增加,在第15d 检测时数目明显减少,第25 d 减少更加明显.
根据鸡瘦素受体(LEPR)基因编码区序列(GenBank:NM_AB033383)设计并合成2 对引物,以肝脏cDNA 为模板扩增出鸡LEPR 胞外域两段成熟肽cDNA 序列.然后将这两段序列克隆到表达载体pRSET-A 的BamH Ⅰ 和Hind Ⅲ 酶切位点之间,构建重组表达载体(pR-LEPR1 和pR-LEPR2)并转化大肠杆菌Ecoli.BL21(DE3).
本文旨在探索鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESC)向精原干细胞(Spermatogonia stem cell,SSC)分化过程中关键lncRNA 及靶基因,并探究其作用机制,为ESC 体外向SSC 诱导分化体系提供新的依据。以RNA-Seq 技术对鸡ESC、原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGC)和SSC进行测序与分析,筛选出显著性差异以及特异性
[目的]本研究旨在家鸡上建立一种高效、稳定的基因组定点编辑技术体系,实现目基因的定点敲除,为后续家鸡基因编辑提供操作依据。[方法]基于NCBI 数据库提供的CDS 序列克隆C2EIP(chr2,Expression In PGC,C2EIP)基因全长,并根据基因序列中APM 的位置设计特异性gRNA1,gRNA2 和gRNA3 并构建cas9/gRNA 载体;将设计好的cas9/gRNA 转染状态