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背景:PD-L1(1(Programmed Death-Ligand 1,程序性死亡配体)表达在活化的T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞表面。在癌组织上可见异常高表达,如肺癌、肝癌、乳腺癌、鳞状细胞癌及卵巢癌组织等。在肿瘤邻近的正常组织中低水平表达,提示它参与肿瘤发生发展,并在削弱抗肿瘤免疫反应中有重要作用。PD-1作为PD-L1的配体主要表达于活化T细胞,PD-1与PD-L1结合后,可抑制T细胞的增殖以及IL-2和IFN-γ等细胞因子的产生,并抑制B细胞的增殖、分化和Ig的分泌。由于PD-1/PD-L1在肿瘤免疫中发挥着重要作用,因此阻断此通路成为肿瘤免疫治疗的一个新方法,而阻断其通路可采用抗PD-1和抗PD-L1的单克隆抗体。目的 :制备PD-L1的m Ab杂交瘤细胞系并对其分泌的抗体特性进行研究。方法 :用重组人PD-L1胞外段免疫Balb/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,通过克隆筛选方法选择能稳定分泌抗PD-L1抗体的杂交瘤细胞株并进行腹水型抗体的制备,用间接ELISA和Western-blot等方法研究其分泌抗体与PD-L1的结合特性。结果 :共制备出4株高亲和力、高特异性的抗人PD-L1 m Ab,杂交瘤细胞培养上清效价1×104,腹水效价达到2×106.Western-blot结果显示制备的抗PD-L1 m Ab能与PD-L1特异性结合。结论 :制备的抗PD-L1杂交瘤细胞株能稳定分泌抗PD-L1抗体,其与PD-L1的特异性结合有望成为一种阻断型抗体,通过阻断PD-1/PD-L1通路激活体内以T细胞为主的抗肿瘤免疫反应。PD-L1抗体在对在自身免疫病、肿瘤生长、病毒感染的免疫检测中有着广阔的应用前景。