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目的：应用高效液相色谱技术建立维生素D3软胶囊中维生素D3含量的快速测定方法.方法：采用Alltima C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈-甲醇(90∶10,v/v)为流动相,流速2.0mL·min-1,检测波长265nm.结果：在本方法中,维生素D3的线性关系良好,线性相关系数(r)为0.9999;精密度和稳定性良好,相对标准偏差(RSD)分别为0.06％和0.25％;平均加样回收率为95.63％,RSD为0.58％.结论：该方法准确、简单、快速,可作为维生素D3软胶囊中维生素D3的含量测定方法.