性别生物学研究一直是进化生物学领域备受关注的热点之一。两栖动物性别分化和发育受环境温度的影响显著且仅在关键发育期起作用,研究无尾两栖动物性腺分化热敏感期确定及其调控机制对深入了解两栖动物性别发育和进化具有重要意义。本研究以虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosa)蝌蚪为实验动物,设置2个恒温(29℃和34℃)处理和6个在不同发育期实行29℃和34℃的变温处理,检测温度转变对无尾两栖动物性别及其相关表型、性激素含量以及性别相关基因表达量的影响。结果显示:(1)生长发育和运动表现均与温度密切相关,高温经历的发育期越长可越加加快变态且产出越小的个体,完全变态前经历高温可提高个体运动能力;(2)性腺分化与温度有关,高温产出较多雄性后代,GS30之前或GS40之后的高温刺激不影响后代性比偏雄,确定GS30-GS40为无尾两栖动物性腺分化热敏感期;(3)GS30时蝌蚪体内雌二醇含量无温度间差异,但在GS30之后经历高温可降低体内雌二醇含量,这与CYP19和SF-1的表达在性腺分化热敏感期受高温抑制有关。综上所述,高温可能通过调控性激素合成及相关基因表达来改变TSP阶段蝌蚪体内性激素含量进而影响性腺向雄性化发育。