超声联合微泡协同脂质体促CXCR4修饰骨髓间充质干细胞体外迁移的实验研究

来源 :第一届全国暨第二届国际超声分子影像学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qixiannu
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  目的 骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有多向分化和免疫调节能力,给许多疾病的治疗展示了美好前景.然而,BMSCs在靶向组织较低的归巢率严重影响了其修复能力,SDF-1/CXCR4轴对BMSCs归巢起到重要作用,但随着体外扩增的进行,BMSCs表面趋化因子受体CXCR4减少.本实验拟通过超声联合微泡协同脂质体方式,实现对大鼠BMSCs的CXCR4质粒转染,及对细胞迁移能力的影响.方法 分离和培养SD大鼠BMSCs,构建pERFP-CXCR4基因质粒,使用超声联合微泡协同脂质体方法转染体外培养3代BMSCs.采用流式细胞分析仪、RT-PCR和免疫荧光染色法检测CXCR4在BMSCs中的表达,利用Transwell方法检验趋化因子SDF-1对BMSCs休外迁移的作用,台盘蓝染色检测细胞死亡率变化.结果 流式细胞分析结果显示超声联合微泡协同脂质体方法转CXCR4基因的阳性率达到26%,显著高于单纯脂质体转染率1.6%,RT-PCR和免疫荧光染色结果也证实BMSCs表达CXCR4.Transwell细胞迁移实验结果表明,趋化因子SDF-1在体外可以诱导MSCs的迁移,CXCR4基因修饰的MSCs的迁移能力5倍于未修饰MSCs,并且当SDF-1浓度为50 ng/ml时迁移细胞最多.细胞死亡率在基因转染前后无明显差异.结论 超声联合微泡协同脂质体能够安全、有效的提高CXCR4在BMSCs表达,该方法对BMSCs的活性未造成影响.为超声联合微泡作用下非病毒转染干细胞提供了一个新的思路,为进一步研究MSCs体内迁移和归巢提供了理论依据.
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作品点评阎智达同学的篆刻已经有了相当的水准。他的白文印均为临摹汉印,但是比汉印硬朗,更加见刀意。这已经有意临的成分了。临作大效果不错,章法整肃,刀法肯定,线条规矩。