【摘 要】
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将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK分别用0,0.5,1.0,2.0μmol/L醋酸铅作用12h后,用MTT法检测不同剂量的醋酸铅对其增殖的抑制率;通过Annexin V-FITC/PI双染法检测醋酸铅引起的NRK凋亡;用罗丹明123检测线粒体膜电位的变化;用western blot检测caspase-3和caspase-9蛋白的表达,以及caspase广谱抑制剂和caspase-9的抑制剂(Z-
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128 华南
【出 处】
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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会
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将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK分别用0,0.5,1.0,2.0μmol/L醋酸铅作用12h后,用MTT法检测不同剂量的醋酸铅对其增殖的抑制率;通过Annexin V-FITC/PI双染法检测醋酸铅引起的NRK凋亡;用罗丹明123检测线粒体膜电位的变化;用western blot检测caspase-3和caspase-9蛋白的表达,以及caspase广谱抑制剂和caspase-9的抑制剂(Z-VAD-FMK和Ac-LEHD-FMK)对醋酸铅诱导细胞凋亡的抑制作用.结果显示,(1)与对照组相比,细胞存活率明显下降(P＜0.05或P＜0.01),醋酸铅明显抑制NRK细胞增殖,且呈一定剂量效应,IC50为(2.44±0.32)μmol/L;(2)凋亡检测表明,随着醋酸铅浓度的升高,细胞凋亡现象越明显;(3)明显减低线粒体膜电位;(4)激活体caspase-3和caspase-9的表达水平呈剂量依赖性增加;(5)Caspase抑制剂能显著抑制醋酸铅诱导的细胞凋亡.结果表明,醋酸铅抑制NRK细胞增殖,可能通过激活caspase依赖性的线粒体信号通路而诱导NRK细胞凋亡.
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