【摘 要】
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通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列，提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列，选择大肠杆菌偏爱的密码子，设计并合成了12条寡核苷酸片段。用PAS方法，全基因合成MSG1部分目的基因，克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后，构建原核表达载体pET-28c/MSG1，并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含重
【机 构】
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山东农业大学 动物科技学院,山东泰安,271018
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会2009年学术研讨会
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通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列，提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列，选择大肠杆菌偏爱的密码子，设计并合成了12条寡核苷酸片段。用PAS方法，全基因合成MSG1部分目的基因，克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后，构建原核表达载体pET-28c/MSG1，并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含重组表达质粒的转化子，IPTG诱导表达，并进行SDS-PAGE分析。测序、酶切鉴定等结果表明表达栽体构建成功，诱导表达后大约在16KD的位置出现明显的蛋白条带。
其他文献
到目前为止，在哺乳动物中已有25种硒蛋白得到了鉴定，但其中仅有少数硒蛋白的功能得以明确。这些硒蛋白中多数具有酶的氧化还原功能(硒代半胱氨酸赋予它们催化或抗氧化的活性)。目前，已证明细胞加工过程中需要硒蛋白参与的包括DNA所需dNTPs的生物合成，损伤或信号过氧化物的移除，被氧化的蛋白与膜的还原，氧化还原信号的调节，甲状腺激素的代谢，硒的转运与贮存，以及潜在蛋白的折叠等。因此，与硒缺乏相关的人类疾病
通过对我国部分地区奶牛场临床型乳房炎病乳中分离鉴定出的无乳链球菌24株、停乳链球菌7株和金黄色葡萄球菌10株，进行三种菌之间及同种异地各菌株间血清学交叉反应试验，结果表明无乳链球菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌三种菌之间无免疫交叉反应，但我国各地同种异地间各菌株间存在不同程度的血清学交叉反应，而且菌株之间交叉反应程度有明显差异。
选择试验牛125头，分为隐性乳房炎阴性牛试验组(投丸组)、对照组(不投丸组)和隐性乳房炎阳性牛投丸组三个组，在饲草料主要成分基本一致的前提下，分别测定试验牛血液中微量元素变化，观察微量元素缓释丸对奶牛隐性乳房炎的防治效果。结果表明，所在地区奶牛隐性乳房炎感染率为72.00%。试验组投丸95d隐性乳房炎阴性保持率为89.47%，转阳率为10.53%；对照组阴性保持率为62.5%，转阳率为37.7%；
选择自然发生酮病牛10头、正常对照组奶牛(健康牛)10头。分别对酮病牛和产后不同时期的奶牛采取尾部皮下脂肪组织，应用荧光定量PCR法观测ADPNmRNA与HSL mRNA表达的状况。酮病牛与对照组(健康)牛分别颈静脉采血，测定血液中相关指标。结果表明：酮病奶牛血糖显著降低，血浆NEFA和BHBA、血清INS降低和INS/GN变小；酮病奶牛HSL mRNA的表达低于围产期健康奶牛产后14天和产后28
本试验分犊牛、后备母牛、成乳牛三个组，每组随机选取了健康的牛只各5头，分别采集其采食后1小时的血液，每头牛采正常血样五份和溶血血样一份，正常血样分别于1、2、3、4、8小时后分离血清，溶血样品于2小时分离血清，用邻甲苯胺法测定血糖值。结果表明：血清不同分离时间的血糖值差异极显著(P＜0.01)，不同牛群血糖值差异极显著(P＜0.01)，溶血血清比正常血清的血糖值要高(P＜0.05)。该结果在现场采
本项试验对呼和浩特地区某牛场健康奶牛(对照组)与产后10天之内奶牛(试验组)的多项血液指标进行了监测，结果表明，试验组奶牛血钙含量极显著低于对照组，血磷含量极显著高于对照组(P＜0.01)：试验组奶牛血钾含量极显著低于对照组，血镁含量极显著高于对照组(P＜0.01)；试验组奶牛血氯含量极显著低于对照组(P＜0.01)，血钠含量组间比较差异不显著(P＞0.05)；试验组奶牛血中羟脯氨酸含量极显著高于
本实验对放牧绒山羊和圈养绒山羊的血液生理生化指标、微量元素含量进行了检测分析。结果显示，圈养羊血液钙、铜、锌、钴，硒含量明显低于放牧羊(P＜0.05)，血液白蛋白、总蛋白、血糖、总超氧化物歧化酶、铜锌超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶含量明显低于放牧羊(P＜0.05)，而甘油三酯含量明显高于放牧羊(P＜0.05).这些指标的差异表明圈养羊因日粮和饲养管理方式的改变而发生了改变，进而导致机体内出现微
丙酸是反刍动物瘤胃微生物发酵产生的一种代谢产物，同时丙酸也是一种重要的生糖先质，为反刍动物提供能量来源。反刍兽月形单胞菌基因组编码有乙酸激酶基因ack，在生物体乙酸生成过程中，乙酸激酶是中间环节的关键酶。反刍动物瘤胃内的微生物在利用饲料中的碳水化合物，厌氧发酵生成挥发性脂肪酸为机体供能的过程中，一部分碳源通过乙酸激酶和磷酸乙酰转移酶参与的Ipta-ack途径合成大量乙酸，从而降低了生糖先质丙酸的产
牛的中毒病由于毒源不同而症状各异，临床上治疗较为困难，加之大多数中毒目前还没有特效解毒药，而对症治疗效果又欠理想，笔者近年来应用自拟防鸟银翘散，在治疗猪的霉玉米中毒取得一定疗效之后，随证加减，用于治疗牛的中毒病，共收治水牛中毒病6例，其中农药草甘膦、百草枯中毒各1例，敌敌畏、黑斑病甘薯中毒各2例，除1例敌敌畏中毒较深，救治无效死亡外，其余5例均获痊愈，治愈率83.3%，实践证明，防乌银翘散不仅能起
选用96头体重16kg左右的“杜×长×大”三元杂交仔猪，按饲养试验要求分成4组，对照组基础日粮中不添加氟(实测值为26.18 mg/kg)，3个试验组分别添加100、250、400 mg/kg氟(氟化钠)，进行了为期50天的饲养试验，然后屠宰并取样分析，研究氟对仔猪消化机能的影响及机理。结果表明：(1)不同剂量氟降低了饲料干物质和粗蛋白的表观消化率(P＜0.02)，250、400 mg/kg氟还降