陡脉冲不可逆电穿孔技术治疗肺部肿瘤的参数筛选、作用机制和动物研究

来源 :中国抗癌学会肺癌专业委员会第十二届全国肺癌学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lsgaoyan2009
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背景:最新研究表明,陡脉冲技术杀灭肿瘤细胞的机制为高能脉冲电场使肿瘤细胞发生不可逆性电穿孔,从而导致肿瘤细胞的直接死亡,其独特的生物电效应在肿瘤的综合治疗中展示出良好的发展前景.但陡脉冲不可逆电穿孔技术作用于肺癌的研究尚未见报道. 目的:(1)验证陡脉冲不可逆电穿孔技术对大细胞肺癌细胞株L9981的有效性,并筛选其对大细胞肺癌细胞株L9981最佳的治疗参数;(2)研究陡脉冲不可逆电穿孔技术杀灭大肺癌细胞株L9981的作用机制:(3)陡脉冲不可逆电穿孔技术杀灭大肺癌细胞株L9981的作用机制;(4)研究不同参数下陡脉冲不可逆电穿孔技术作用于大细胞肺癌细胞株L9981裸鼠皮下移植瘤模型,筛选陡脉冲作用于裸鼠皮下移植瘤模型的最佳参数,并在组织水平上探讨其作用机制;(5)通过陡脉冲作用于大细胞肺癌细胞株L9981后,应用细胞凋亡检测、细胞线粒体膜电位检测、细胞内PH值变化的检测以及细胞内游离钙离子浓度检测,探讨陡脉冲的分子作用机制。 方法:(1)通过陡脉冲作用于大细胞肺癌细胞株L9981后,应用细胞凋亡检测、细胞线粒体膜电位检测、细胞内PH值变化的检测以及细胞内游离钙离子浓度变化;(2)通过设置不同的3组陡脉冲治疗参数,作用于肺癌细胞株L9981后,应用Vi-Cell细胞活力分析、MTT,检测L9981细胞的死亡率、细胞抑制率以及细胞增殖能力; 结果:(1)陡脉冲不可逆电穿孔技术对大细胞肺癌细胞株L9981具有较好的杀灭作用,不同的陡脉冲治疗参数下有明显差异:(2)细胞凋亡检测结果表明,经陡脉冲电处理的L9981细胞主要经历坏死和凋亡,随着电参数的增大,坏死细胞的比例迅速增加;(3)细胞线粒体膜电位检测表明,陡脉冲作用下,细胞线粒体膜电位发生去极沁,导致细胞死亡和凋亡;细胞内PH值变化的检测表明。 结论:(1)陡脉冲不可逆电穿孔技术对大细胞肺癌细胞株L9981有较好的杀灭作用,电压幅值2000V1cm,脉冲宽度100us,脉冲频率1Hz,脉冲个数10个,重复次数6次对肺癌细胞株L9981为最佳的治疗参数,在这组参数下,能最大程度杀灭肿瘤细胞;(2)陡脉冲通过细胞的凋亡而导致肿瘤细胞的死亡,从而杀灭肿瘤细胞;(3)陡脉冲不可逆电穿孔技术对大细胞肺癌细胞株L9981裸鼠皮下移植瘤模型有较好的抑瘤效应;(4)陡脉冲引起肿瘤组织的凝固性坏死,可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡引起肿瘤组织的坏死。
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