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位点特异性重组涉及十分广泛的生命过程,发生于特定的靶位点之间,实现小分子或者大片段基因组序列间的整合、切离或倒位。近年来,位点特异性重组酶介导的重组反应在遗传工程操作中得到了广泛的应用,由于该反应具有底物专一、快速高效、易于改造应用等优点,吸引了越来越多的相关领域研究者的关注。根据氨基酸序列的同源性和催化方式的差异,位点特异性重组酶分为酪氨酸和丝氨酸重组酶两大家族。链霉菌噬菌体编码BT1整合酶属于丝氨酸重组酶家族。我们异源表达并纯化了BT1整合酶,在测定其酶活的基础上,鉴定了其反应的最小位点分别为36 bp (attB)和48 bp (attP),随之建立了优化的体外位点特异性重组系统。进一步研究BT1催化重组反应的机理,发现DNA链的切割起始并不需要联会复合体的形成,只在单一底物存在的条件下即可以较低的效率发生;并发现四聚体蛋白结合attP随后捕获attB的联会途径。