海南省尖吻鲈中锥虫的培养与鉴定

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锥虫是一种营寄生生活的单细胞血液鞭毛虫,其宿主种类广泛,包括鱼类、两栖类、爬行类、鸟类、哺乳类,甚至在植物中都有发现。目前对锥虫的研究集中于可感染哺乳动物的种类,如布氏锥虫,而对其他脊椎动物类锥虫的研究尚显不足。2017年中国海南省一鱼类养殖场尖吻鲈(Lates calcarifer)患病,采血镜检发现病鱼血液中有大量锥虫。将该血液样品带回后,我们使用本实验室常用培养基HMI9、TVM-1、TCM、1640、DMEM、L15等对该锥虫进行培养,发现于TCM培养基中该锥虫生长最好,速度约每3天增殖5倍,最高密度为3x106个/毫升。经过三个月的连续体外培养,锥虫仍对鱼有感染力。对该锥虫提取DNA后,使用SSUr RNA与ITS序列引物进行PCR扩增、测序,于NCBI中序列比对发现该锥虫与同样发现于海南省的石斑鱼锥虫(Trypanosoma epinepheli)的核苷酸99.5%相同,故认定该锥虫为石斑鱼锥虫。石斑鱼与尖吻鲈同属鲈形目,故此推测鲈形目鱼可能较易被锥虫感染。本实验成功建立了石斑鱼锥虫的培养模型,为后续的研究提供了可靠保障。
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