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研究背景:iNKT(invariant natural killer T)细胞是一类同时具有T细胞和NK细胞表型及功能特征的固有免疫样T细胞亚群,可识别CD1d分子提呈的脂类抗原。活化以后,iNKT细胞通过快速分泌多种细胞因子及直接杀伤效应,在抗肿瘤免疫应答中发挥重要作用。然而现有研究主要局限在小鼠iNKT细胞抗瘤效应,对人iNKT细胞抗瘤效应认知极少。目的 :本研究选择T细胞来源的Jurkat细胞,B细胞来源的721.221细胞以及T淋巴瘤细胞系H9作为靶细胞,探究人iNKT细胞对不同肿瘤细胞差异性应答的特征和机制。方法 :应用α-GalCer体外刺激结合PBS57/CD1d四聚体分选建立人iNKT细胞体外扩增体系与分选方法,构建CD1d高表达细胞系作为靶细胞,进行人iNKT细胞杀伤实验。并从靶细胞表面脂类抗原组成、共刺激分子的表达、Fas分子的表达情况等方面探究人iNKT细胞对靶细胞差异性杀伤机制。结果 :人iNKT细胞对不同肿瘤细胞表现出差异性的细胞因子分泌效应,其中Jurkat与H9细胞刺激的iNKT细胞表现出抗瘤细胞因子分泌障碍。同时人iNKT细胞对不同肿瘤细胞的杀伤强度及杀伤机制不同,表现为对Jurkat细胞杀伤效应最强而对H9细胞几乎没有杀伤作用。另外,iNKT细胞对不同来源靶细胞的杀伤效应均具有CD1d依赖性。尽管我们的研究显示显示iNKT细胞对Jurkat细胞的强细胞毒效应主要依赖于Fas介导的靶细胞凋亡,但是三种肿瘤细胞的Fas表达水平不存在显著的差异,并且Fas蛋白序列一致,说明iNKT细胞对三群细胞的差异性杀伤效应不是由于Fas水平差异或Fas编码基因突变所致。同时共刺激信号的加强与脂类抗原的置换,无法逆转iNKT细胞对不同靶细胞的差异性效应。说明脂类抗原组成、共刺激信号以及Fas之外的其它因素可影响iNKT细胞对不同靶细胞的差异性应答。结论 :人iNKT细胞对不同肿瘤细胞表现出差异性细胞因子应答与细胞毒效应,该差异性与不同肿瘤细胞的脂类抗原组成、共刺激信号以及Fas水平无关。