目的:采用反相液相色谱-电喷雾质谱（RP-LC/ESI-MS）和亲水作用液相色谱-电喷雾质谱 （HILIC/ESI-MS）相结合的方法建立尿液大鼠尿液代谢组学研究数据检测方法。方法:RP-LC 最佳色谱条 件为:色谱柱:Prevail C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；柱温:25 °C；流动相A:10 mmol·L-1 甲酸铵缓冲 液（甲酸调pH 4.0）；B:0.1％甲酸乙腈，A 与B 梯度洗脱；HILIC 最佳色谱条件为:色谱柱:Alltima HP HILIC （2.1 mm × 150 mm，3 μm）；柱温:25 ℃；流动相A:10 mmol·L-1 甲酸铵缓冲液（甲酸调pH 4.0）；B:0.1％ 甲酸乙腈，A 与B 梯度洗脱；质谱条件:ESI 离子源，离子源温度350 ℃，毛细管电压3.5 kV，雾化压力 50.0 psi，干燥气流速11.0 L·min-1，质谱扫描范围m/z 15 ~2 200，正、负离子检出模式。结果:RP-LC/ESI-MS 和HILIC/ESI-MS 两种色谱系统同时应用对大鼠尿液中极性不同的内源性物质实现了较为全面的检测。结 论:该方法可为代谢组学研究中数据采集的全面性提供参考。