Prokaryotic expression and immunological study of Helicobacter pylori recombinant vacA-CtxB protein

来源 :四川省医学会第十六次检验医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:slippers3000
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  Objective:Immunological study on recombinant vacA-CtxB proteinAbstract Methods:This study aims to express Helicobacter pylori vacA-CtxB recombinant protein (VCTB) that translated by the fusion gene containing vacuolating cytotoxin and cholera toxingene in DH5α stain.The antigenicity and immunogenicity is validated, which provides theoretical basis to generate oral vaccine for preventing H.pylori infection Results:Through transforming pQE-vctB vector into E.coli DH5α stain, the recombinant VCTB was induced to express by IPTG.Western blot was used to detect the antigenicity of VCTB protein, and the VCTB was purified by Ni-NTA beads.The ELISA was applied to validate VCTB immunogenicity in serum and flushing fluid of intestine from the gavage mouse.Conclusion: The relative molecular weight of VCTB was identified about 40 KDa through SDS-PAGE analysis.VCTB can be obtained in more than 92% purity by affinity chromatography method.Western Blot results showed that VCTB protein could interact with antiserum VacA.The affinity of IgG and IgA was significantly higher in VCTB immunized mouse than in VacA immunized mouse (P <0.01).
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