【摘 要】
：
目的:模拟体内微环境,探讨兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用.方法:用钳夹法建立兔坐骨神经损伤模型,并采用组织匀浆器制作神经匀浆,高速离心取其上清液.从兔颈背部脂肪中分离培养脂肪干细胞并传至P3代,诱导前24h加10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)入培养液中以促分裂,再以正常坐骨神经、损伤3d、损伤7天及损伤14d坐骨神经匀浆上清液作为诱导剂进行诱导.诱导后观察细胞的形态变
【机 构】
：
天津医科大学总医院骨科生物力学实验室,天津市和平区鞍山道154号,300052;天津市天津医院骨科研究所,天津市河西区解放南路406号,300211
论文部分内容阅读
目的:模拟体内微环境,探讨兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用.
方法:用钳夹法建立兔坐骨神经损伤模型,并采用组织匀浆器制作神经匀浆,高速离心取其上清液.从兔颈背部脂肪中分离培养脂肪干细胞并传至P3代,诱导前24h加10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)入培养液中以促分裂,再以正常坐骨神经、损伤3d、损伤7天及损伤14d坐骨神经匀浆上清液作为诱导剂进行诱导.诱导后观察细胞的形态变化;MTT法测定不同诱导剂诱导后细胞活性;免疫细胞化学染色检测细胞中S-100、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;RT-PCR检测诱导前后细胞的GFAP及S-100的变化.
结果:加入神经匀浆诱导后24h，部分细胞的形态已发生改变，4d后大部分细胞不仅在形态上表现为许旺样特征，而且5-100及GFAP等特异性抗体呈阳性表达，RT PCR结果也显示诱导组GFAP, S-100的表达增高，且损伤7d组阳性率最高。
结论:损伤坐骨神经匀浆上清液能够将脂肪干细胞诱导为类许旺细胞。
其他文献
目的:对于大面积烧伤病人,自体皮肤移植皮源不足和异体皮肤移植中的免疫排斥反应给患者的救治带来了极大不便.聚合物基人工皮肤具有材料来源广泛,价格低廉,组织相容性好等优点,是一种快速有效保护伤口的重要方法.尝试制备多孔硅橡胶薄膜做为人工皮肤,防止体液的过度流失和外界细菌的感染,进而促进伤口的愈合.方法:利用溶剂挥发诱导相分离法制备厚度和孔径可调的多孔硅橡胶膜.对多孔硅橡胶薄膜的孔结构进行了扫描电镜观察
目的:以魔芋葡甘聚糖(KGM)微球为基质,用1,4-丁二醇二缩水甘油醚将KGM微球活化,将胶原蛋白覆层到微球上并对胶原层进行交联,制备覆层均匀、稳定的微载体.考察偶联条件对胶原层的影响以及微载体细胞培养效果的影响.方法:以直径为160-212μm、粒径均一的KGM微球为基质,采用具有无抗原性、生物相容性好等优点的胶原蛋白进行覆层微球,建立两步偶联蛋白的微载体制备方法,系统考察了各因素对微载体制备的
目的:本项目通过在脱细胞角膜基质(ACM)上复合羊膜上皮细胞(AEC)制备成具有天然角膜类似结构功能的组织工程角膜,用于角膜移植以达到支架材料与植床良好整合,并有效抑制角膜血管化,瘢痕化,达到长期修复角膜损伤的作用.方法:通过在ACM上皮面分三次接种AE细胞,再经4天器官培养,使AEC细胞在ACM上形成5-6层类似正常角膜上皮层的细胞层.将构建成功的组织工程角膜TEC和ACM分别于兔眼表进行板层移
目的:理想的椎体融合器应具有完好的力学性能和生物活性.采用异体支架材料,研制一种新型腰椎融合器,解决现有腰椎融合器力学强度不足、融合效果不佳等问题.方法:取异体皮质骨,加工成弹头形或方形的植骨块,植骨块设有器械夹持部位和具有填充口的中空腔室,器械夹持部位位于植骨块的一端,植骨块的一组相对的侧面相平行,另一组相对的侧面具有一定的夹角,最后经脱脂脱蛋白等步骤去除抗原,得到新型腰椎融合器.按照国际通行标
目的:骨缺损伴随的相关感染(如慢性骨髓炎等)在临床上相当普遍,治疗也颇为棘手;本研究针对骨科临床上存在的这类问题,设计了万古霉素复合硫酸钙/矿化胶原骨修复材料,材料为多孔结构,可自固化成型,局部释放药物,在治疗感染的同时修复骨缺损.方法:本研究通过水热法制备了α型半水硫酸钙,结晶水含量在6％左右,体外模拟生物矿化过程制备了矿化胶原材料,进一步将α型半水硫酸钙、矿化胶原、药物万古霉素进行复合,制备一
目的:应用BMSCs构建的软骨组织经体内长期移植后逐渐出现血管侵入、矿化、形成骨组织.本研究观察了血管生成抑制因子ChM-I BMSCs体内构建软骨血管化的作用,为改善和提高BMSCs来源的软骨组织的表型稳定性提供新的方法.方法:用RT-PCR的方法比较ChM-I基因在BMSCs和关节软骨细胞之间的表达差异.用RT-PCR的方法从兔的关节软骨组织中获得ChM-I基因克隆并构建高滴度的重组腺病毒Ad
目的:评估PKH26标记技术结合活体成像系统在组织工程椎间盘中应用的可行性.方法:从山羊椎间盘中分离髓核组织,通过酶消化法获取原代细胞,倒置显微镜下观察,传代获取P1代髓核细胞,按照说明书对P1代髓核细胞进行PKH26荧光标记,荧光显微镜下观察标记后的细胞荧光强度,并进行甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色,台盼蓝染色比较标记前后细胞活性,MTT法检测标记前后细胞增殖特性,实时荧光定量PCR检测细胞
目的:探讨原代贴壁培养的SD大鼠的骨髓间充质干细胞随着传代次数的增加,与其乳鼠骨髓间充质干细胞株细胞表型的差异,为后续研究生物治疗骨质疏松症提供细胞源.方法:通过传代粗略比较两组细胞的形貌、增殖能力,借助流式及免疫组化技术分析两组细胞表型因子的表达差异.结果:流式细胞技术鉴定SD大鼠原代培养的第七代骨髓间充质干细胞与其乳鼠骨髓间充质干细胞株的CD71、CD44、CD90、CD45的阳性表达是一致的
目的:探讨RNA干扰(RNAi) aggrecanases后的软骨细胞作为种子细胞的可行性,为组织工程软骨提供一种新的种子细胞.方法:采用正常的软骨细胞以及aggrecanase-1,2受抑制软骨细胞分别作为种子细胞,将之复合到壳聚糖/明胶材料上进行体外培养,通过常规HE、甲苯胺蓝、番红O、Masson三色染色、免疫组织化学染色、扫描电镜观察以及RT-PCR等方法检测在培养的过程中蛋白多糖以及ag
目的:采用人羊膜进行脱细胞,粉碎,均质处理,制备得到一种可注射的美容填充剂,可用于面部皱纹及褶皱的修复.本文对其长期皮下填充的有效性进行了深入研究.方法:采用大鼠皮下植入模型,按照点状注射的方式,将脱细胞羊膜微粒注射至大鼠背部脊柱两侧的真皮组织的深层及皮下组织浅层部位,每只大鼠注射2点,每点注射量为0.5mL,共注射30只大鼠.在注射后1周,2周,4周,8周,12周,16周,24周,32周,40周