改良的检测ApoE4基因型的方法

来源 :2008中华消化病学年度讲坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:missile60
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目的:建立快速、特异检测载脂蛋白E(ApoE)基因型的方法。 方法:采用碱裂解法抽提漱口水来源的颊黏膜上皮细胞的基因组DNA;优化各种改善高GC含量的添加剂种类和浓度,包括二甲亚枫、甘油、甲酰胺、甜菜碱等,PCR产物进行HhaI酶切并DNA垂直电泳从而分析个体的ApoE基因型。 结果:漱口水来源的基因组DNA能替代外周血DNA进行PCR扩增。甜菜碱、甲酰胺、甘油等对于ApoE4基因的扩增效果并不明显,而5%DMSO能显著提高ApoE4基因的扩增效率,并显著提高PCR扩增的特异性。 结论:无创的简单的ApoE4基因分型被建立,极大易化了对ApoE4相关疾病的分子流行病学的研究,对于其他基因的基因型研究提供有益的线索。
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