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为建立一种能够区分猪瘟病毒(cSFv)强毒与弱毒疫苗c株的sYBR Green I荧光定量RT—PcR结合熔解曲线分析方法,本研究对GenBank中登录的25株csFv强毒株和兔化弱毒疫苗c株全基因组序列进行比较分析。设计一对共用下游引物以及分别针对csFv强毒株与弱毒疫苗的特异性上游引物,其Tm值分别为84.5±O.5℃和88.5±0.5℃,熔解曲线分析显示为单特异峰。检测结果显示本实验建立的鉴别csFV强毒感染与弱毒疫苗的荧光定量RT.PcR结合熔解曲线分析方法特异性强,对其他相关病毒无特异性扩增;敏感性高,最低检出量为5×RID50的细胞疫苗基因组拷贝;重复性好;并且扩增效率高、线性范围广、检测时间短,可对免疫猪群中csFv强毒感染做出快速准确的鉴别检测,为有效防治猪瘟提供依据。