目的脂毒性诱导的肝脏代谢紊乱在代谢性脂肪肝的发病机制中起重要作用。升麻素（Cimifugin,Cim）是一种从防风根中提取的香豆素衍生物,具有抗炎症、抗过敏和抗氧化应激等多种生物学特性。然而,关于Cim的肝保护作用的研究有限。本文旨在研究Cim对肝细胞脂毒性和脂肪变性的保护作用,并阐明其可能的机制。方法本研究采用未转化的小鼠肝细胞系AML-12,分别与棕榈酸（palmitic acid,PA）或油酸（oleic acids,OA）孵育以模拟肝脂毒性或脂肪变性模型。采用乳酸脱氢酶释放量检测法、噻唑蓝反应比色法、Hoechst细胞核染色法、Western Blot等方法检测Cim对PA诱导的肝细胞损伤的保护作用;通过检测活性氧蔟含量、线粒体膜电位、Bcl2/Bax蛋白的表达探究Cim对脂毒性诱导的肝细胞线粒体功能紊乱的影响;通过甘油三酯试剂盒及Bodipy染色法检测Cim对OA诱导的肝细胞脂质沉积的影响;通过使用MAPKs、TLR4等信号通路的激动剂或抑制剂及使用特异性siRNA沉默SIRT1探究Cim保护脂毒性诱导的肝细胞损伤的潜在调控机制。结果 Cim以剂量依赖方式显著逆转PA诱导的肝细胞损伤,同时改善氧化应激和线粒体损伤。Cim预处理显著逆转PA诱导的TLR4/p38 MAPK激活和SIRT1降低。通过药物激动剂激活TLR4/p38MAPK或通过特殊的siRNA基因沉默SIRT1可消除Cim的肝保护作用,提示TLR4/p38 MAPK和SIRT1通路参与Cim改善的肝损伤机制。此外,Cim预处理显著改善了OA诱导的肝细胞脂质积累,TLR4激活或SIRT1敲除可显著阻断Cim改善的脂质积累。本研究还发现TLR4激动剂LPS可显著加重PA上调的TLR4表达,而TLR4抑制剂CLI-095显著减轻PA下调的SIRT1表达,且SIRT1基因敲除不影响PA诱导的TLR4表达,提示在PA处理的肝细胞中,SIRT1是TLR4的潜在靶点。此外,LPS显著阻断Cim回调的PA降低的SIRT1。以上结果提示TLR4调控的SIRT1通路参与Cim对脂毒性的保护机制。结论综上所述,本研究发现了Cim对脂毒性诱导的肝细胞死亡和脂肪变性的保护作用。TLR4调控的p38 MAPK和SIRT1通路参与了Cim保护的肝脏脂毒性。上述研究提示,Cim是改善脂毒性介导的肝脏代谢紊乱的潜在候选药物。