迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)三型分泌系统(T3SS)效应蛋白EseB介导的细菌自动凝集和生物膜研究

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迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)是引起多种鱼类爱德华氏菌病的病原菌,感染宿主包括多种淡水鱼类、海水鱼类及观赏鱼。Ese B是迟缓爱德华氏菌三型分泌系统(T3SS)的效应蛋白,与Ese C和Ese D共同作用,在细菌表面形成T3SS的输送器结构。本研究选取迟缓爱德华氏菌WT、Δese B、Δflh B、Δese C和Δesa N五个菌株为研究对象,通过扫描电镜、透射电镜等方法研究迟缓爱德华氏菌自凝现象;通过免疫荧光、免疫电镜等方法开展介导细菌自凝的相关蛋白质研究;利用结晶紫染色、扫描电镜等方法开展迟缓爱德华氏菌生物膜形成能力的研究。实验结果表明WT和Δflh B菌株发生自动凝集;Δese C部分凝集;Δese B和Δesa N不凝集。通过扫描电镜和透射电镜观察,发现WT和Δflh B菌株,细菌之间通过一种僵直的长管状表面结构相互连接;Δese C菌株存在这一结构,但相对于WT和Δflh B菌株比例明显减少;Δese B和Δesa N菌株没有这一结构。通过免疫荧光和免疫电镜观察,表明Ese B是长管状结构的组成成分,Ese C和Ese D并不参与这一结构的组成。结晶紫染色结果表明,WT和Δflh B形成生物膜;Δese C形成生物膜但能力弱于WT和Δflh B;Δese B和Δesa N不形成生物膜。大肠杆菌需要鞭毛作用才能形成生物膜,本研究中迟缓爱德华氏菌在鞭毛缺失的条件下可以形成生物膜,这一结果对细菌生物膜形成提出了新的观点。
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