采用2D电泳初步进行牛精子蛋白分离研究

来源 :第十次全国畜禽遗传标记研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huaqizhang
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为了建立牛精子蛋白的分离技术路线,对牛精子细胞裂解方法、双向电泳条件等进行了摸索,结果发现采用尿素-盐酸胍两步裂解法裂解精子细胞制备蛋白,并使用13cm非线性胶条进行蛋白二维电泳,能取得较好的实验结果.图谱经二维电泳软件分析,可检测出约800多个蛋白质点.对精子蛋白双向电泳条件的摸索,为后续牛精子特异性蛋白的检测和分析奠定了基础.
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本研究以8个中国地方绵羊群体和1个外来群体的20个个体为研究对象,通过对Cytb基因的全序列测定,结果表明:绵羊的单倍型多样性为97.1%.所有序列的平均碱基组成为27.1%T,28.5%C,31.4%A及13.0%G,G+C含量为41.5%,核苷酸多样性为0.602%.在所有序列中共检测到43个变异位点,其中包括40处转换和3处颠换.Fus中性检验表明差异不显著(0.10>P>0.05),说明绵
本文对中国美利奴高山型细毛羊的血液蛋白(酶)Hb、Tf、Alb、Es等位点进行了遗传检测,并将具有多态性的位点与其主要经济性状开展了标记研究,以期探讨该群体遗传结构和寻找相关的遗传标记,为该品群的早期选中提供依据.
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本文以波尔山羊及其杂交后代为实验材料,通过PCR-RFLP技术检测到每个群体均有Xsp Ⅰ多态,测序后发现A→G转换是导致出现多态性的原因.对该位点与体重、屠体性状进行最小二乘分析时发现:该位点与断奶重和眼肌面积有关(P<0.05):AG型显著大于GG型(P<0.05),且有AG>AA>GG规律.
利用PCR-SSCP技术研究了136头秦川牛GHR基因第10外显子多态性.结果表明,所研究的秦川牛群体GHR基因该座位存在PCR-SSCP多态性,发现了A、B、C三个等位基因,其基因频率依次为0.5956、0.2905、0.1140,并且群体处于HARDY-WEINBERG平衡状态.对该座位的多态性进行分析,认为该座位有较好多态性,提示在秦川牛群体的培育改良中可加强该座位人工选择的强度.
通过DNA测序,对浙江温岭高峰牛MHC-DRB3基因exon2多态性进行研究,共检测到63种复等位基因,其中32种新复等位基因.基因频率的范围从0.078~0.009,R-07的基因频率最高为0.078,其次为R-01和R-155,均为0.043,最低的基因频率为0.009.复等位基因间多态位点68个,统计分析表明,非同义替换率(dN)高于同义替换率(dS),抗原结合位点编码序列的dN与dS差异极
本研究首次利用PCR-RFLP技术研究相同季节4月(±10d)龄纯种秦川牛(QQ)及杂种牛秦安(AQ)、秦德(DQ)、秦利(LQ)4个群体164个个体H-FABP基因的多态性.结果表明,QQ及AQ、DQ、LQ群体H-FABP-HaeⅢ基因座的2075 bp的PCR产物被HaeⅢ限制性酶消化后表现多态性,它们的等位基因A/B频率分别为:0.232/0.768、0.333/0.667、0.178/0.
本文利用PCR-SSCP技术对113头郏县红牛CLPG基因的多态性进行了分析.发现有三个等位基因A、B、C,他们的基因频率分别为0.8673,0.0619和0.0708.仅发现AA、AB和AC三种基因型,频率分别为0.7345,0.1239,0.1416.群体的杂合度(Hk),有效等位基因数(Ne)、多态信息含量(PIC)分别为0.2389,1.1331和0.2256.该位点处于Hardy-Wei
本研究克隆测序了牦牛HSP72基因的全序列.利用一系列的生物信息学软件分析了该基因的结构、密码子偏好性和HSP72蛋白的氨基酸组成.结果表明:牦牛的HSP72基因序列全长为1926bp,无内含子,共编码641个氨基酸;牦牛的HSP72基因和HSP72蛋白的氨基酸序列与普通牛、猪、人相比存在着一定差异,这可能是导致他们之间对温度适应性差异的主要原因之一.
利用5个微卫星基因座BM1818、BM143、BM1443、BM1905、BM711对90头河北荷斯坦母牛进行了遗传检测.用非变性(中性)聚丙烯酰胺凝胶电泳检测微卫星的PCR扩增产物.结果表明BM1818、BM143、BM1443、BM1905、BM711的等位基因数/多态信息含量/有效等位基因数/杂合度分别为5/0.618/3.096/0.677、7/0.727/4.202/0.762、5/0.