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目的分析T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合转录因子Blimp1、IFN-γ、IL-10在活动性肺结核(TB)患者及潜伏结核感染患者诊断中的检测意义。方法选取2014年7月至2015年6月来我院就诊的100例疑似TB患者作为病例组。另选择同时期门诊常规健康体检者50例作为健康对照组。对病例组患者进行随访3个月,根据活动性结核病诊断的金标准——痰培养结核分枝杆菌(MTB)结果及潜伏结核感染定义,将实验组患者分为活动性TB组(简称活动性组,n=70)和潜伏性结核组(简称潜伏性组,n=30)。对所有样本进行外周血T-SPOT.TB检测,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有样本血浆IFN-γ、IL-10表达水平,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测所有样本外周血转录因子Blimp1水平。比较各组样本间Blimp1、IFN-γ、IL-10水平差异,比较活动性组患者和潜伏性组患者中T-SPOT.TB结果阳性者各孔spots数大小。利用受试者工作特征曲线(ROC)分析T-SPOT.TB、Blimp1、IFN-γ、IL-10以及上述指标联合诊断活动性TB和潜伏性结核的效能,根据约登指数,确定最佳诊断值,计算诊断灵敏度、特异度。结果1活动性组患者年龄范围19~80岁,平均年龄48.54±18.14岁,潜伏性组患者年龄范围22~78岁,平均年龄49.67±16.98岁。2各组患者T-SPOT.TB结果显示,健康对照组患者中,T-SPOT.TB结果显示阳性0例,阴性50例。活动性组患者中,T-SPOT.TB结果显示阳性63例,阴性7例。潜伏性组患者中,T-SPOT.TB结果显示阳性27例,阴性3例。3活动性组T-SPOT.TB阳性患者与潜伏性组T-SPOT.TB阳性患者比较,A孔spots数差异无统计学意义(P>0.05),B孔spots数具有统计学意义,活动性组高于潜伏性组(P<0.05),A+B孔spots数差异无统计学意义(P>0.05)。4单因素方差分析结果显示,各组患者Blimp1、IFN-γ、IL-10水平存在差异(P<0.05)。活动性组患者Blimp1、IFN-γ、IL-10水平均高于健康对照组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。活动性组患者Blimp1、IFN-γ、IL-10水平均高于潜伏性组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。潜伏性组患者Blimp1、IFN-γ、IL-10水平均高于健康对照组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。5以活动性结核诊断标准作为金标准,纳入SPSS软件绘制ROC曲线,结果显示,Blimp1诊断的ROC曲线下面积(AUC)为AUC=0.824,95%CI:0.741~0.907,P<0.05,当约登指数最大为0.495时,灵敏度为0.629,特异度为0.867,此时Blimp1最佳诊断值为4.770;IFN-γ的AUC为:AUC=0.854,95%CI:0.778~0.929,P<0.05,当约登指数最大为0.595时,灵敏度为0.729,特异度为0.867,此时IFN-γ最佳诊断值为103.95pg/ml;IL-10的AUC为:AUC=0.877,95%CI:0.811~0.944,P<0.05,当约登指数最大为0.657时,灵敏度为0.757,特异度为0.900,此时IL-10最佳诊断值为119.71pg/ml;T-SPOT.TB spots数的AUC为:AUC=0.742,95%CI:0.642~0.842,P<0.05,当约登指数最大为0.371时,灵敏度为0.371,特异度为1.000,此时T-SPOT.TB spots数最佳诊断值为87.30。6 T-SPOT.TB分别联合Blimp1、IFN-γ、IL-10绘制ROC曲线,结果显示,T-SPOT.TB联合Blimp1诊断的ROC曲线下面积(AUC)为AUC=0.826,95%CI:0.742~0.910,P<0.05,当约登指数最大为0.476时,灵敏度为0.643,特异度为0.833;T-SPOT.TB联合IFN-γ的AUC为:AUC=0.860,95%CI:0.788~0.933,P<0.05,当约登指数最大为0.624时,灵敏度为0.757,特异度为0.867;T-SPOT.TB联合IL-10的AUC为:AUC=0.883,95%CI:0.818~0.948,P<0.05,当约登指数最大为0.638时,灵敏度为0.771,特异度为0.867;T-SPOT.TB联合Blimp1、IFN-γ、IL-10的AUC为:AUC=0.973,95%CI:0.948~0.998,P<0.05,当约登指数最大为0.833时,灵敏度为0.900,特异度为0.933。结论1 Blimp1、IFN-γ、IL-10在活动性TB和潜伏性TB患者及健康体检者间存在差异,Blimp1与IFN-γ、IL-10可能参与到了机体抗结核的免疫反应中。2单独采用SPOT.TB、Blimp1、IFN-γ、IL-10指标用来诊断活动性TB和潜伏性TB的价值仍有限,T-SPOT.TB、Blimp1、IFN-γ、IL-10联合诊断的价值更大。3临床工作中,对于T-SPOT.TB B孔spots数>87.30,外周血Blimp1 mRNA相对灰度值>4.770,IFN-γ值>103.95pg/ml,IL-10值>119.71pg/ml的患者,虽然无活动性TB患者典型症状,影像学检查无异常或肺部病灶为陈旧性病灶,空洞存在或已闭合,但仍强烈提示3个月期间可能是活动性TB。图2幅;表6个;参86篇。