【摘 要】
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为建立猪呼吸道病相关几种的病毒PCR/RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒（PRV,gB,AF257079）、猪圆环2型病毒（PCV2,ORF2,NC 005148）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRR
【机 构】
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贵州大学动物科学学院; 贵州省动物疫病预防控制中心;
【基金项目】
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贵州省科学技术基金项目资助(黔科合J字[2013]2110号);贵州省2014年农业攻关项目资助(黔科合NY字[2014]3055号)
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为建立猪呼吸道病相关几种的病毒PCR/RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒（PRV,gB,AF257079）、猪圆环2型病毒（PCV2,ORF2,NC 005148）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV,ORF6,NC001961）、猪瘟病毒（CSFV,C,AY805221）、猪细小病毒（PPV,NS1,NC 001718）和猪流感病毒（SIV,M,GU086140）6种常见病毒的相关保守基因序列分别设计一对特异性引物,通过对其条件的优化,建立了检测以上6种病毒的PCR/RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192 bp（PRV）、255 bp（PCV2）、364bp（PRRSV）、530bp（CSFV）、759bp（PPV）和981 bp（SIV）。通过实验证明该检测方法具有良好的特异性和敏感性,对该6种病毒的核酸检测最低浓度依次为2.5×10-3ng、2.2×10-4ng、3.2×10-3ng、8.3×10-3ng、3.7×10-3ng和3.7×10-3ng。该方法的建立为检测以上6种病毒提供了有参考价值的方法。
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