三种鱼类β-actin启动子的序列比较及唐鱼β-actin启动子功能的初步检测

来源 :2006第二届北京实验动物科学国际论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lgj2097
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
利用高保真PCR技术克隆了唐鱼(Tanichthys albonubes)、斑马鱼(Danio rerio)和罗非鱼(Oreochromis niloticus)β-actin 5端侧翼区的启动调控区及部分开放阅读框,测序结果表明,所克隆得到的三种鱼类β-actin其长度分别为1465bp、1654bp和1733bp.但均包括一段长为108bp左右的β-actin基因上游调控序列、不翻译的第一个外显子和第一个内含子以及部分开放阅读框(长度为90bp).其中上游调控序列中含有对转录过程起着重要作用的元件:CCAAT Box,TATA Box,CArG Box.开放阅读框均编码一段含30个氨基酸的多肽,此多肽具有高度的保守性,其中唐鱼的与斑马鱼的同源性为100%;与罗非鱼的同源性为96.7%.将唐鱼β-actin的启动子插入不含启动子的红色荧光表达载体pDsRed2-1中,构建以红色荧光蛋白为报告基因的重组表达载体,序列测定证实启动子已正确插入到表达载体中.通过显微注射技术将带有唐鱼启动子的红色荧光表达载体(TB-Red)线性化后注射到唐鱼的受精卵中,荧光显微镜下观察外源基因在胚胎的表达.结果表明:在孵化后72h可观察到唐鱼仔鱼体表发出的红色荧光,证实了唐鱼β-actin基因启动子具有有效的基因表达活性.
其他文献
目的:观察喹硫平治疗青少年精神分裂症的临床疗效和安全性,探讨喹硫平血药浓度与临床效应的关系及临床意义。   方法:40例青少年精神分裂症患者,男18例,女22例,单一使用喹硫平400
重度肺动脉高压是结缔组织病的致死性并发症.对于儿童PAH继发于结缔组织病尤其原发性干燥综合征鲜有报道.本文报告了一例儿童PSS合并PAH,比较了与成人的异同.并就PSS合并PAH
本文主要介绍了超声影像诊断乳腺疾病新技术,包括Sono CT实时复合成像技术、全景扫查、超声造影、三维,四维(实时三维)、超声弹性成像等技术。
目的:探讨彩色多普勒血流显像(CDFI)在下肢深静脉血栓形成(DVT)诊断中的价值. 方法:对89例拟诊下肢DVT患者的712条下肢静脉进行CDFI和静脉造影检查. 结果:CDFI检出并经
阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者多伴有呼吸,血流和心血管系统的病理生理改变,故其腭垂腭咽成形术(UPPP)的麻醉具有呼吸道不易保持,术中血流动力学波动大,麻醉难度高等特
目的:探讨舒芬太尼在无痛人工流产术中的应用.方法:将200例要求无痛人工流产的妇女随机分为两组:舒芬太尼组(SF组)和芬太尼组(F组),每组100例.分别采用舒芬太尼0.15ug/kg或芬
目的:观察术中经硬膜外注入曲马多抑制牵拉反应和术后镇痛时效.方法:90个做下腹部手术行连续硬膜外麻醉且阻滞效果优的病例,依时间顺序随机分为3组,每组男20例,女10例,在术前经
目的:分析椎-基底动脉(VBA)超声多普勒在眩晕病因诊断中的作用. 资料与方法:本组资料观察了104例眩晕患者的椎动脉超声多普勒血流测值和常规的相关实验室检查指标的改变,
目的金黄仓鼠原代肾细胞被大量用于制造乙型脑炎减毒活疫苗,因此金黄仓鼠原代肾细胞的安全性一直备受关注和重视,本研究就是验证SPF金黄仓鼠原代肾细胞的安全性.方法通过与英
目的:探讨彩色多普勒超声配合超声引导细针穿刺对小乳癌(病灶直径三2.0 cm)的诊断价值. 方法:对17例经病理学证实为小乳癌病灶的二维及彩色多普勒表现进行回顾分析.触诊