猪圆环病毒2型感染后PBMCs中IL-2 mRNA的动态变化

来源 :中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guohan123123
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通过RT-PCR技术从猪外周血单核细胞(PBMCs)中扩增和克隆了猪细胞因子IL-2 338bp的部分序列,并得到pGEMT-IL2质粒;在pGEMT-IL2基础上利用反向PCR技术构建了缺失92bp的pGEMT-dIL2 cDNA竞争质粒.对pGEMT-dIL2质粒进行10<-7>倍稀释后同2×10<5>~2<10>×10<5>倍系列的pGEMT-IL2质粒采用同一对引物进行竞争PCR,将产物在2﹪琼脂糖凝胶上电泳后,采用Kodak KDS1D3.0软件进行分析后,以338bp片段同246bp片段的分子个数比的对数值作纵坐标,以不同稀释倍数pGEMT-IL2质粒的分子个数的对数值为横坐标建立了直线回归方程,其相关系数为0.95.采用该直线回归方程对人工感染猪圆环病毒2型(PCV2)SPF猪后3、7、10、14、21、28、35和42天PBMCs中IL-2 cDNA变化的分析结果表明,感染后21天IL-2 cDNA上升,至28天出现峰值,至35天基本回复到初始水平,而后进一步攀升至42天,且攻毒组同对照组在感染后14和21天IL-2 cDNA水平经t试验分析结果表明差异极显著(P<0.01).
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利用4个微卫星标记(OarFCB11,OarAE101,McM218,McM38)对波尔山羊、太行山羊和河北奶山羊的等位基因频率、群体多态信息含量、有效等位基因数、杂合度和遗传距离进行了遗传检测.结果表明:4个微卫星标记在波尔山羊、太行山羊和河北奶山羊3个品种中存在多态性,可以用于山羊遗传多样性的评估;从不同品种来看,太行山羊的遗传变异程度最大,而波尔山羊的遗传变异程度相对较小;波尔山羊与河北奶山
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迄今为止,由于转基因胚胎干细胞(ES细胞)和胚胎生殖细胞(EG细胞)的缺乏,在家畜上尚无用这些细胞生产绿色荧光后代的报道.猪转基因EG细胞系的建立,不仅可为转基因猪生产,也可为进一步研究多能干细胞的发育及定向分化提供有力的手段.作者在成功分离猪EG细胞后,进一步分离建立猪转基因EG细胞系,以期为相关研究奠定基础.
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