红笛鲷RAG基因的克隆及表达分析

来源 :中国水产学会鱼病学专业委员会2011年学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shadow2100
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  红笛鲷(Lutjanus sanguineus)俗称红鱼、红曹鱼,是我国南方沿海主要的经济鱼类之一。然而随着水产养殖业的迅猛发展,疾病频繁暴发,给红笛鲷养殖业造成巨大的经济损失。对鱼类的免疫系统及其抵御外界感染的免疫反应进行研究,致力于提高养殖鱼类的免疫力,被认为是应对暴发性疾病的积极有效的主动防疫技术手段。
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采用组织块移植培养技术,对来源于锦鲤(Cryprinus carpiod)鳍条组织的细胞进行原代培养,建立了锦鲤鳍条组织细胞系,命名为Koi-Fin,该细胞系已稳定传代60多代.锦鲤鳍条组织细胞为成纤维样细胞,最佳培养基为MEME,最适培养温度为25℃,最适血清体积分数为10%,细胞群体倍增时间为43.5h.
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褶纹冠蚌(Cristaria plicata)作为我国重要的淡水育珠蚌之一。谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GSTs)是解毒系统中的Ⅱ相解毒酶。褶纹冠蚌piGST cDNA全长816 bp,包括615 bp的开放阅读框编码205个氨基酸,5端非编码区19 bp,3端非编码区182 bp含加尾信号(AATAAA)及ployA尾。
褶纹冠蚌(Cristaria plicata)是我国重要"淡水育珠蚌"之一。本文对褶纹冠蚌过氧化氢酶(cpCAT)的cDNA进行了克隆与原核表达。利用RACE-PCR及同源克隆方法,克隆出cpCAT cDNA全长。该基因全长为4863 bp,且有3个外显子,2个内含子。
褶纹冠蚌HSP90基因的cDNA全长序列为2674bp,其中5UTR(非编码区)有83 bp;3UTR有410 bp,包括28bp的poly (A).在poly (A)上游20 bp处存在AATAAA加尾信号,在poly (A)上游120bp处存在1个RNA不稳定模体ATTTA (RNA instability motifs);HSP90基因的开放阅读框(Open Reading Frame,OR
本研究首先对细胞进行温度梯度处理,确定适宜的高温处理温度,在此基础上,进一步研究高温对草鱼肝细胞生物学活性的影响及作用机理。草鱼肝细胞铺到培养板中,27℃培养过夜。
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刺参(Apostichopus japonicus)体腔内及水管系统内都充满了液体,且含有大量的游离细胞,许多学者认为两器官内的细胞是完全相同的。本研究从细胞类型、数量及表面抗原等方面对不同规格刺参体腔内和水管系统(波里氏囊)内游离细胞进行了比较,以期弄清两者之间的关系及各自的功能。