白菜小孢子发育相关基因BCMF2的分离和表达特征分析

来源 :2004年全国蔬菜分子育种研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshiwangxincheng
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利用cDNA-AFLP技术,以A18和T16引物为引物对,对矮脚黄白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis Makino var.communis Tsen et Lee cv.Aijiaohuang)雄性不育两系不育株系与可育株系的表达差异进行分析,结果在可育中蕾和可育大蕾中特异表达的差异条带一条,且可育大蕾表达量强于可育中蕾;可育系连莲座期叶,开花期叶、花茎、小蕾和不育系各部位未表达.将该基因命名为BCMF2,回收克隆基因片段,测序结果该片段长286bp.利用RACE方法,扩增了该基因的3和5末端.该基因全长1485bp,其碱基序列与拟南芥多聚半乳糖醛酸酶有83﹪的相似性.该基因的起始密码子ATG位于第67位 ,终止密码子为TAA,位于第1329位,ORF为1263bp,编码420个氨基酸,与拟南芥从花蕾的cDNA文库获得的编码的多聚半乳糖醛酸酶的氢基酸序列相似性最高,为79﹪.BCMF2编码的蛋白质的分子量为43844.28道尔顿;等电点为8.203;pH7.0时的电荷为6.050.系统进化树分析表明,该基因与其它植物的花粉、花药特异PG酶基因聚为一类.
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