【摘 要】
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目的评价一株人源性轮状病毒毒株的生物学,免疫学特性及用于轮状病毒疫苗制备的开发可行性。方法经细胞培养,分离到轮状病毒毒株ZTR-5株,并在MA104细胞上经蚀斑筛选纯化后,获得单一克隆接种至Vero细胞上适应性培养,免疫荧光定量检测病毒的感染性滴度,对收获的病毒液进行离心、超滤、抗原纯化,甲醛灭活,抗原定量检测Al(OH)_3吸附制备的实验性疫苗。使用不同剂量(8EU、32EU、128EU、256
【出 处】
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新型疫苗与抗体创制关键技术及质量控制研讨会论文集
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目的评价一株人源性轮状病毒毒株的生物学,免疫学特性及用于轮状病毒疫苗制备的开发可行性。方法经细胞培养,分离到轮状病毒毒株ZTR-5株,并在MA104细胞上经蚀斑筛选纯化后,获得单一克隆接种至Vero细胞上适应性培养,免疫荧光定量检测病毒的感染性滴度,对收获的病毒液进行离心、超滤、抗原纯化,甲醛灭活,抗原定量检测Al(OH)_3吸附制备的实验性疫苗。使用不同剂量(8EU、32EU、128EU、256EU)经肌内注射免疫小鼠,免疫三次,间隔2周。采用间接ELISA法检测血清特异性抗体效价。结果通过分离及蚀斑纯化,筛选得到一株纯化的病毒株ZTR-5,在Vero细胞上适应性后感染性滴度达7.35log CCID_(50)/ml;大量培养收获的病毒原液滴度为7.57logCCID_(50)/ml,制备获得轮状病毒样品抗原含量为2560EU/ml;经肌内注射,初次免疫后,所有剂量组动物均获得抗体阳转,阳转率为100%;第一次加强免疫后,各组血清特异性抗体水平均明显增高,免疫剂量为128EU和256EU的两组小鼠血清抗体效价均达1:10240;第二次加强免疫后,各剂量组血清抗体效价依次达1:5120,1:7456,1:14481.54,1:14481.54。结论获得一株人源轮状病毒野生型毒株ZTR-5株,该毒株有良好的细胞适应性,可在Vero细胞上稳定,高滴度复制增殖,所制备的疫苗具良好免疫原性。
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