恶性肿瘤是研究开发治疗性抗体最活跃的领域，治疗性抗体以其疗效肯定、毒副作用低、可以反复给药等优点，愈来愈受到关注。 根据文献报道，本论文设计PCR引物，合成出HER 2的RLD 2基因序列，并实现了其在大肠杆菌中的高效表达。经过柱层析纯化，蛋白纯度可达95％以上。采用固相抗原筛选法，利用RLD 2蛋白从人源性噬菌体抗体库中筛选抗HER 2的抗体。经过4轮筛选，对RLD 2具有亲和力的抗体得到富集，回收率增加了约200倍，从最后一轮筛选的平皿上随机挑选了46株菌株，初步鉴定亲和活性，得到了28株具有亲和活性的克隆。从中随机选取6株鉴定其特异性，结果显示，6株克隆只对RLD 2蛋白显示出高亲和活力，而对所用的作为阴性对照的牛血清白蛋白(BSA)，乙酰肝素酶小亚基(HPA-8 kD)，HPO突变株(mHPO)，人表皮生长因子(EGF)，漆酶(LCC)没有明显的亲和活力。 本文选取了HER 2／neu低表达人乳腺癌细胞株MCF-7，Balb／c小鼠成纤维细胞Balb／c-3T3，HER 2／neu高表达人乳腺癌细胞株SKBR-3和人脐静脉血管内皮细胞ECV 304共4株癌细胞株，进一步检测抗体在体外的活性。实验结果表明，6株抗体对HER 2／neu高表达的人乳腺癌细胞SKBR-3的生长有抑制作用，抑制率最高可达40％，而对HER 2／neu低表达的人乳腺癌细胞MCF-7和人脐静脉血管内皮细胞ECV 304的生长没有抑制作用。选取对SKBR-3抑制作用最强的2株克隆，对Balb／c-3T3细胞也有明显的抑制作用。 本文用大肠杆菌表达所筛选出的抗体Fab段，按照常规的方法，用GeneⅢ两端的限制性内切酶双酶切后，将粘性末端平滑化，用连接酶连接，电转化大肠杆菌表达。此外，我们还尝试在酶切除去GeneⅢ之后，在Fd段基因之后加入了6个组氨酸标签，以便于抗体表达后的检验和纯化。对于抗体表达量的提高的实验还在继续进行中。