顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶反应体系的建立

来源 :2010年华北地区输血协作组工作会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:samallhu
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目的:对顺乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶进行酶促反应动力学研究,建立顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶的反应体系。 方法: 根据反应产物NADPH在340 nm 波长下的吸光度与酶活性存在的正比关系,测定异柠檬酸脱氢酶和所建立反应体系的活性大小。从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶反应体系,利用该体系对铁离子的浓度进行检测。 结果:异柠檬酸脱氢酶催化反应的终产物随时间的增长而增多,直至趋于稳定;从猪肝中提出可溶性蛋白质,建立顺乌头酸酶.异柠檬酸脱氢酶反应体系,该体系可正常工作,当加入螯合剂去除铁离子,体系无活性;透析去除螯合剂后,再向体系中加入足量铁离子,活性恢复。 结论:利用顺乌头酸酶-异柠檬酸脱氢酶建立的反应体系,可有效检测铁离子浓度。
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