论文部分内容阅读
[目的]喹乙醇作为一种抗菌饲料添加剂,用来治疗动物细菌性感染疾病和促进动物生长。但因其毒性机制仍不清楚,许多国家和地区仍将其作为饲料添加剂而使用。本文通过体内和体外试验研究喹乙醇的肝毒性分子机制,以及GADD45a与p21在喹乙醇诱导细胞凋亡和S期阻滞的分子机制,为进一步科学合理评价喹乙醇的安全性提供数据支持。[方法]本文通过建立喹乙醇小鼠模型,研究喹乙醇诱导小鼠肝毒性机制,以及GADD45a与P21蛋白在体内的表达情况,然后用慢病毒包装的方法建立GADD45a和p21低表达稳定转染细胞系,研究了GADD45a和p21在喹乙醇诱导细胞凋亡和周期阻滞中的作用,以及p53调控GADD45a与p21作用机制。[结果]研究结果表明,本研究成功建立喹乙醇C57BL/6小鼠模型、GADD45a低表达稳定转染细胞系和p21低表达稳定转染细胞系;喹乙醇能明显诱导小鼠肝氧化应激与损伤,且具有一定的剂量依赖性,同时证明喹乙醇诱导的肝毒性涉及线粒体凋亡途径、MAPK通路、周期阻滞通路、自噬通路、及Nrf2/HO-1、Akt、NF-kB等信号通路;GADD45a和p21在喹乙醇诱导细胞凋亡和S期阻滞中的具有保护性的作用;PI3K/AKT通路和Nrf2/HO-1通路参与喹乙醇诱导的细胞凋亡与S期阻滞;体外p53基因缺失细胞模型与体内p53基因敲除小鼠模型证明p53缺失可以降低喹乙醇诱导的小鼠肝毒性损伤与S期阻滞。[结论]JNK/p38信号通路参与GADD45a调控的喹乙醇诱导的DNA损伤和细胞S期阻滞;干扰p21增加喹乙醇诱导的线粒体凋亡和细胞S期阻滞,通过激活PI3K/AKT通路和抑制Nrf2/HO-1信号通路;p53通过抑制自噬及激活JNK/p38通路加剧喹乙醇诱导细胞凋亡及S期阻滞。