【摘 要】
：
本研究以实验室前期构建的，含有PCV2全基因组的重组质粒pEASY-Blunt-PCV2为最初模板，利用重叠PCR的方法，共设计4对引物，对PCV2Rep蛋白上N-糖基化位点23aa-25aa(NPS)、256aa-258aa(NQT)和286aa-288aa(NAT)分别进行单点、双点和三点突变(将N突变为D)，成功构建7个突变体感染性克隆。
【机 构】
：
山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会2013年学术年会
论文部分内容阅读
本研究以实验室前期构建的，含有PCV2全基因组的重组质粒pEASY-Blunt-PCV2为最初模板，利用重叠PCR的方法，共设计4对引物，对PCV2Rep蛋白上N-糖基化位点23aa-25aa(NPS)、256aa-258aa(NQT)和286aa-288aa(NAT)分别进行单点、双点和三点突变(将N突变为D)，成功构建7个突变体感染性克隆。
其他文献
Obiective:Previously,we generated a monoclonal anti-idiotypic antibody (designated Mab2-5G2) that is specific for the syngenic mouse antibodies against PRRSV GP5,binds Marc-145 cells and porcine alveo
引言 猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的高度接触性传染病.为了更好的了解广东地区PRRS病毒分子流行病学情况,在2007到201 1年间从267个广东养殖场中采集到3199份疑似病料,对其中51株阳性样品并进行了ORF5基因序列分析.
引言 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)被普遍视为最严重的疾病之一.它的病原体,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)不仅会导致母猪繁殖障碍,也会引起所有年龄段猪的呼吸问题.自从2006爆发的高致病性PRRS疫情以来,几乎所有在中国和越南,2006年的分离的PRRSV和2009年再次出现的PRRSV,都属于北美基因型.此外,欧洲基因型PRRSV也被报道.因此,两个基因型的共存为新病毒的产生提供了最佳条
本研究的目的 在于确定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是否也在杂交野猪群中流行.我们于2008-2009年期间对中国的杂交野猪进行了PRRSV的血清学调查.从山东省未免疫PRRSV疫苗的杂交野猪群中收集613份血样,其中167份(27.2％)是PRRSV阳性,从中分离的两株PRRSV(TAYZ和ZCYZ)用MARC-145细胞进行蚀斑纯化,测序并进行动物实验.试验结果显示,TAYZ株和ZCYZ
分别设计两对区分经典株与变异株的PRRSV特异性引物,对2012年本实验室收集到的来自6省28个免疫PRRS弱毒疫苗猪场的271份临床送检样品进行RT-PCR检测.PRRSV的检出率为29.52％(80/271),其中变异株的检出率为25.83％ (70/271),经典株的检出率为13.65％ (37/271),27份样品中可以PRRSV变异株和经典株的同时检出率为10％ (27/271).对临床
本研究于2009-2011年间从中国东部16个猪场中分离到7株PCV2,并测定了其全长序列.为分析其基因型和亚型归属,我们将其ORF2序列与从NCBI中获得的381条PCV2ORF2序列一起比对后,按照欧洲PCVD委员会推荐的邻接法对其构建系统进化树.结果显示,本研究所分离到的两株PCV2(HYan09与NBiaol0)与国内外历年分离的另外10株PCV2(10AH、10GX、09HaiN1、09
引言 对一家600头基础母猪的种猪场(从分娩到育肥的单点饲养模式)实施了猪蓝耳病毒(PRRSV)的净化.在成功净化过程中,以下因素是比较重要的:建立母猪群体针对PRRSV的免疫力;停止从外界引种;保育单元和育肥单元彻底地清群和重新建群;保持猪只的单向流动和严格控制人员通行.在净化过程中,任何时间均未使用PRRSV疫苗.材料和方法 中国江西省单点饲养模式的某600头基础母猪的种猪场,包括配种单元/妊
引言 蛋清中具有的多种生物活性物质,尤其是一些小碱性蛋白在抵御外界病原菌的侵袭起到重要作用.从鸭蛋清中鉴定出的dBPS2(duck Basic Protein Small 2)就属于小分量碱性蛋白.本研究克隆出dBPS2基因,通过构建dBPS2原核表达载体诱导表达重组鸭dBPS2蛋白并初步验证抑菌作用,为进一步研究其功能奠定基础.
引言 利用microarray方法研究猪特异病毒疾病的发病机制和宿主的细胞反应有关,并发现了一些基因表达量与病毒刺激有关.这对猪免疫应答研究,寻找提高免疫力的基因和标记辅助抗病育种有着深远意义.为了理解病毒感染和宿主细胞互作的基因表达调控的分子机制,本项目拟以双链RNA病毒类似物PolyI∶C和DNA甲基化抑制剂Aza-CdR转染猪肾上皮细胞,通过基因表达芯片(Microarray)技术以及功能基
子宫是雌性哺乳动物极其重要的生殖器官,出生后子宫发育由许多因素调控,包括类固醇激素、细胞-细胞和细胞-细胞外基质的相互作用。一氧化氮合酶(NOS)和可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)是NO/cGMP信号通路成员,尽管NO/cGMP信号通路参与多种生理和病理过程,但其参与出生后子宫发育的作用机制未见报道。我们以出生后第7天(D7)、第21天(D21)、第35天(D35)猪子宫为实验材料,利用免疫组织化学,