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目的采用高效液相色谱法测定(R,S)-告依春、连翘酯苷A和连翘苷的含量,并同时建立抗病毒口服液的指纹图谱。方法采用Waters CORTECS C18(柱长1 50mm,内径4.6mm,2.7μm)色谱柱;流动相为0.1%磷酸溶液-甲醇梯度洗脱;检测波长为2 36nm;柱温为29℃。结果含量测定条件通过方法学验证,(R,S)-告依春在1 6.86ng-527ng、连翘酯苷A在156.4 3ng-4888.50ng、连翘苷在1 22.97ng-3842.85ng的范围内与相应峰面积呈良好的线性关系;(R,S)-告依春平均回收率为89.9%,RSD为2.9%;连翘酯苷A平均回收率为93.5%,RSD为3.6%;连翘苷平均回收率为95.1%,RSD为0.8%。建立了抗病毒口服液的高效液相色谱特征指纹图谱共有模式,指认了其中9个共有峰,44批抗病毒口服液的相似度均大于0.9。结论该法所建立的抗病毒口服液含量测定方法简便,结果准确,专属性强,结合特征性强的指纹图谱可更好地控制其质量。