【摘 要】
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目的:探索儿茶酚胺调控宫颈癌细胞对化疗药物的敏感性,以及此过程的精确分子机制.方法:(1)Western-Blot分析儿茶酚胺刺激宫颈癌细胞对SIRT1的表达影响;(2)实时定量RT-PCR检测儿茶酚胺刺激宫颈癌细胞刺激后SIRT1转录水平的影响;(3)Western-Blot和免疫荧光法检测儿茶酚对化疗药物诱导p53乙酰化的影响;(4)双荧光素酶法检测儿茶酚胺对阿霉素诱导的p53转录活性增强的影
【机 构】
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军事医学科学院 基础医学研究所 病理生理学研究室 河南大学细胞与分子免疫学重点实验室
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目的:探索儿茶酚胺调控宫颈癌细胞对化疗药物的敏感性,以及此过程的精确分子机制.方法:(1)Western-Blot分析儿茶酚胺刺激宫颈癌细胞对SIRT1的表达影响;(2)实时定量RT-PCR检测儿茶酚胺刺激宫颈癌细胞刺激后SIRT1转录水平的影响;(3)Western-Blot和免疫荧光法检测儿茶酚对化疗药物诱导p53乙酰化的影响;(4)双荧光素酶法检测儿茶酚胺对阿霉素诱导的p53转录活性增强的影响;(5)TUNEL染色和Annexin VFITC染色测定儿茶酚胺是否影响阿霉素诱导的细胞凋亡;(6)通过细胞增殖实验检测儿茶酚胺能否诱导宫颈癌细胞的化疗药物抵抗;(7)Western-Blot和双荧光素酶实验检测SIRT1在儿茶酚胺抑制阿霉素诱导的p53乙酰化水平以及p53转录活性中的作用;(9)通过动物模型评价儿茶酚胺在体内能否拮抗化疗药物阿霉素的抑瘤效应;(10)免疫组化检测β2-AR在宫颈癌临床组织标本中表达模式.结论:在本研究中,首次发现儿茶酚胺通过诱导β2-AR活化,激活SIRT1表达上调,抑制p53乙酰化和p53的转录活性,拮抗化疗药物阿霉素的抗癌效应.并首次报道,儿茶酚胺能够在动物体内抑制化疗药物阿霉素对宫颈癌的治疗效果.此外,本研究亦首次发现β2-AR在宫颈癌临床组织中高表达.本研究的进一步深入可能为临床提高化疗药物疗效提供理论依据.
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