【摘 要】
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目的 探讨ERK信号转导通路在CdCl2诱导HEK293细胞低剂量兴奋效应(hormesis)过程中的作用.方法 以0、0.0005、0.005、0.05、0.5、5、50、500 μM浓度的氯化镉(CdCl2)染毒HEK293细胞12h和24h,采用MTT、WST-8法检测细胞的增殖情况；然后分别观察RNAi阻断craf基因、使用ERK信号转导通路特异性抑制剂对细胞进行预处理后CdCl2对HEK
【机 构】
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北京大学公共卫生学院毒理学系,北京 100191
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目的 探讨ERK信号转导通路在CdCl2诱导HEK293细胞低剂量兴奋效应(hormesis)过程中的作用.方法 以0、0.0005、0.005、0.05、0.5、5、50、500 μM浓度的氯化镉(CdCl2)染毒HEK293细胞12h和24h,采用MTT、WST-8法检测细胞的增殖情况；然后分别观察RNAi阻断craf基因、使用ERK信号转导通路特异性抑制剂对细胞进行预处理后CdCl2对HEK293细胞增殖的影响；western blot检测CdCl2染毒HEK293细胞3h、6h和12 h ERK磷酸化蛋白表达水平,RT-PCR方法检测c-fos、c-myc基因转录水平的变化.结果 CdCl2作用于HEK293细胞12h后,0.5umol/L CdCl2可引起纫胞增殖明显的增加(P＜0.05),50、500 umol/L CdCl2可引起细胞增殖明显的减少(P＜0.05)；CdCl2作用于HEK293细胞24h后,0.05 umol/L CdCl2可引起细胞增殖明显的增加(P＜0.05),50、500 umol/L CdCl2可引起细胞增殖明显的减少(P＜0.05)；RNAi阻断c-raf基因(c-raf基因的mRNA水平及蛋白水平表达明显降低)以及应用ERK通路抑制剂对细胞进行预处理后,均未观察到细胞增殖明显的增加.CdCl2作用于HEK293细胞3h、6h、12h后,p-ERK蛋白表达无明显变化(P＞0.05)；CdCl2浓度为0.5 umol/L时可引起c-fos基因转录水平明显的增高(P＜0.05),其他浓度无明显变化(P＞0.05)；c-myc基因转录水平随CdCl2浓度的升高而增高,浓度为5 umol/L、50 umol/L时增高明显(P＜0.05).结论 低剂量CdCl2作用于HEK293细胞可以引起Hormesis效应,ERK信号鞲导通路在CdCl2诱导HEK293细胞发生低剂量兴奋效应过程中可能发挥了重要作用.
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