阿司匹林对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞

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目的观察阿司匹林对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AlveolarepithelialtypeⅡcell,AEC-Ⅱ)的保护效应,探讨其抗氧化损伤的机制。方法将原代分离纯化培养的成年大鼠AEC-Ⅱ分为生理盐水组(NS组)、过氧化氢氧化损伤组(H2O2组)、阿司匹林预处理1、2组(A1~3组)。A1~3组分别加入阿司匹林50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L预处理。NS组在培养40小时(h)后加入生理盐水,H2O2损伤组、A1~3组在培养40h后加入0.5mmol/L H2O2,3h后观察细胞形态学变化及贴壁细胞计数,四甲基偶氮唑盐酶反应比色法(MTT法)检测细胞存活率。同时应用免疫组化及PCR法测定在无H2O2干预情况下NS组、A1~3组在培养20h、40h、60h血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白及HO-1 mRNA在AEC-Ⅱ中的表达。结果 (1)胰蛋白酶消化、免疫粘附法可收获AEC-Ⅱ2~2.5×107个/鼠,纯度和活性>90%。(2)与NS组比较,H2O2组细胞间隙增宽,贴壁细胞数量减少,细胞皱缩,细胞存活率明显下降;与H2O2组比较,A1~3组贴壁细胞数增多,细胞形态较完整,无明显细胞皱缩,A1~3组中细胞存活率明显增加(P<0.05)。(3)与NS组比较,A1~3组HO-1蛋白及HO-1mRNA表达量明显增加(P<0.05)。结论 (1)阿司匹林对离体培养氧化损伤的大鼠AEC-Ⅱ具有保护效应。(2)阿司匹林在离体培养的大鼠AEC-Ⅱ中,上调HO-1表达,HO-1可能是阿司匹林对离体培养大鼠氧化损伤的AEC-Ⅱ保护的重要调节因子。
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