【摘 要】
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通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列，提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列，选择大肠杆菌偏爱的密码子，设计并合成了12条寡核苷酸片段．用PAS方法，全基因合成MSG1部分目的基因，克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后，构建原核表达载体pET-28c/MSGl，并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含重
【出 处】
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山东畜禽健康养殖与福利学分会成立大会暨山东省健康养殖及动物福利高层论坛
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通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列，提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列，选择大肠杆菌偏爱的密码子，设计并合成了12条寡核苷酸片段．用PAS方法，全基因合成MSG1部分目的基因，克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后，构建原核表达载体pET-28c/MSGl，并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含重组表达质粒的转化子，IPTG诱导表达，并进行SDS-PAGE分析．测序、酶切鉴定等结果表明表达载体构建成功，诱导表达后大约在16KD的位置出现明显的蛋白条带．
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应用特异性引物从山东某发病鸡场病鸡体内分离到的命名为JN09的新城疫病毒(Newcastle Disease Virus，NDV)中扩增其F基因，预计扩增片段大小为1700bp。RT-PCR扩增出的目的片段大小与预计扩增片段大小相符合，测序结果表明扩增片段与新城疫病毒F基因序列相符。对其F基因进行遗传进化分析，并结合山东地区近几年来的分离毒株的相关信息，着重分析该地区近年来新城疫病毒F基因的变异情
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