论文部分内容阅读
目的:肠道菌群影响宿主的抗感染免疫,本研究拟探讨肠道菌群调节HBV感染的免疫应答及影响HBV感染结局的机制。材料和方法:选用4周龄雄性SPF级C57BL/6小鼠,用广谱抗菌素饲养小鼠破坏小鼠的肠道菌群,再通过尾静脉高压水注射pSM2-HBV1.3质粒HBV复制模型。检测小鼠血清内的抗原及HBV DNA水平,流式细胞术分析肝脏内T细胞的功能,Real-Time PCR检测免疫调控分子在肝脏内的表达水平。结果:与对照组小鼠相比,抗生素处理组小鼠肝脏内CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、Treg细胞、Th17细胞、MDSC细胞的频率上无显著差异;但CD4~+Ki67~+T细胞、CD8~+Ki67~+T细胞频率明显高于对照组;CD4~+Foxp3~+RORγt~+T细胞频率明显高于对照组;而CD4~+TNFα~+T细胞、CD4~+IL2~+T细胞、CD8~+TNFα~+T细胞的频率明显低于对照者,CD4~+IFNγ~+T细胞、CD8~+IL2~+T细胞、CD8~+IFNγ~+T细胞频率较对照组无明显差异;Arginase1、IL-10、PD-L1、IDO等分子的表达水平较对照组无明显差异。分别用两组小鼠的肝脏匀浆液进行细菌培养,抗生素处理小鼠的肝脏组织能培养出多种来源于肠道的细菌,而对照组小鼠中只能培养出的细菌极少数的细菌,两组之间有显著差异;给两种小鼠分别注射pSM2-HBV1.3质粒,对照组小鼠在注射后两周内清除HBV,抗生素处理组小鼠的HBV复制时间明显延长、病毒血症能持续至5-7周。且抗生素治疗小鼠肝脏内特异性CD4~+IFNγ~+T细胞、CD4~+IL~2+T细胞、CD8~+IFNγ~+T细胞、CD8~+IL2~+T细胞的频率显著降低。结论:破坏肠道菌群能使肝脏内的T细胞的抗病毒功能下降,并使HBV的复制时间明显延长。破坏小鼠肠道菌群后可在肝脏组织内能检测到细菌,提示肠道菌群发生移位并进入肝脏。肠道菌群移位可能是引起肝脏内T细胞抗病毒能力下降的重要原因。