【摘 要】
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以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌 -溶血素蛋白作为研究对象，分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异。SDS-PAGE分析检测纯化产物，Bradfbrd法测定蛋白含量，兔红细胞测定半数溶血效价。结果显示这两种方
【机 构】
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山东省农业科学院奶牛研究中心,济南 250100 山东农业大学动物科技学院, 泰安 271O18
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌 -溶血素蛋白作为研究对象，分析比较通过凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA Spin Columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异。SDS-PAGE分析检测纯化产物，Bradfbrd法测定蛋白含量，兔红细胞测定半数溶血效价。结果显示这两种方法得到的纯化产物在53 kD处均呈现单一清晰带，达电泳级纯度。与此同时，凝胶过滤对目的蛋白的纯化率为14.04％，蛋白含量为0.337 mg/mL，溶血活性为1519 HU/mg;镍柱亲和层析的纯化率为17.5％，蛋白含量为0.35 mg，mL，溶血活性为1463 Hu/mg。由此可见，凝胶过滤得到的纯化产物在蛋白含量和蛋白活性方面丝毫不亚于镍柱亲和层析纯化试剂盒。
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